小鼠胚胎玻璃化冷冻对子代发育和胚胎印记基因表达的影响的开题报告.docx

小鼠胚胎玻璃化冷冻对子代发育和胚胎印记基因表达的影响的开题报告
一、选题背景
随着人类生殖医学技术的不断进步，胚胎玻璃化冷冻已成为一种比较常见的胚胎冷冻方法。其优点在于胚胎不会出现冷冻危害和次生损伤，能够长期保存，便于运输和储存实现定点冷冻等。由于玻璃化冷冻的使用范围不断扩大，从小鼠到人类，从原核到真核等。故对小鼠胚胎的玻璃化冷冻技术，以及玻璃化冷冻后对胚胎的发育和胚胎印记基因表达的影响进行研究，对于深入了解胚胎的生长发育及其相应的遗传表达规律等是很有必要的。
二、研究内容
本研究旨在探究小鼠胚胎玻璃化冷冻方法对子代发育和胚胎印记基因表达的影响。具体研究内容包括：
1.探究小鼠胚胎的玻璃化冷冻方法；
2.对小鼠胚胎玻璃化冷冻后的发育情况进行观察和比较；
3.分析小鼠胚胎玻璃化冷冻对其子代发育的影响；
4.探究小鼠胚胎玻璃化冷冻对静态MII卵母细胞和胚胎印记基因表达的影响；
5.探讨胚胎印记基因表达的变化对小鼠胚胎玻璃化冷冻后子代发育的影响。
三、理论意义
本研究通过对小鼠胚胎玻璃化冷冻及后续子代发育和胚胎印记基因表达的研究，对于深入研究胚胎的发育和遗传表达机制等有着重要的意义。特别地，通过实验的开展，可以为胚胎玻璃化冷冻技术的应用提供科学依据，为相关临床技术的开展提供指导和借鉴。同时，对于揭示胚胎罕见遗传疾病及其治疗和预防等，也将起到重要的作用。
四、研究方法
1.小鼠胚胎的玻璃化冷冻方法。选取雄性和雌性C57BL/6J小鼠，在其发情期采集其卵巢组织，用体外培养液进行处理，选用经过培养的卵母细胞进行以下实验。
2.对小鼠胚胎玻璃化冷冻后的发育情况进行观察和比较。将不同处理方法下的胚胎进行孵化，观察其发育情况和存活率等。
3.分析小鼠胚胎玻璃化冷冻对其子代发育的影响。通过对玻璃化冷冻的胚胎进行移植，进一步观察其子代的发育情况。
4.探究小鼠胚胎玻璃化冷冻对静态MII卵母细胞和胚胎印记基因表达的影响。采用qPCR方法研究小鼠胚胎在玻璃化冷冻过程中印记基因的表达情况，并对不同处理方法下印记基因的表达情况进行比较。
5.探讨胚胎印记基因表达的变化对小鼠胚胎玻璃化冷冻后子代发育的影响。通过对印记基因表达情况的分析，探讨其对玻璃化冷冻后子代发育的影响并进行比较。
五、预期成果
本研究预期获得以下成果：
1.对小鼠胚胎玻璃化冷冻方法进行相关探究，并优化小鼠胚胎的玻璃化冷冻技术；
2.探究小鼠胚胎玻璃化冷冻后对其发育和存活情况以及子代发育的影响；
3.实验分析小鼠印记基因的表达情况，并评估小鼠胚胎玻璃化冷冻对印记基因表达的影响。
4.对胚胎玻璃化冷冻技术的成熟度和安全性得出相关结论。
六、结论
本研究将通过对小鼠胚胎的玻璃化冷冻方法和其对子代发育和印记基因表达的影响进行探讨，从而对进一步改进和完善生殖医学技术，指导相关临床技术的开展具有重要的意义。