【推荐】第二次--经口急性毒性实验.ppt

急性经口毒性试验急性毒性试验一、实验目的急性毒性作用：
指机体一次接触或24小时内多次接触化学物后在短期（最长到14天）内所发生的毒性效应，包括一般行为、外观改变、大体形态变化以及死亡效应。
LD50：半数致死剂量
指引起一组受试实验动物半数死亡的剂量。常用以表示急性毒性的大小。
其值越小，表示外源化学物的毒性越强；反之，毒性越低。
LD50是经过统计学计算得到的毒性参数，是一个统计量，受实验动物个体易感性差异的影响较小，因此是最重要的急性毒性参数。
二、实验原理三、材料和试剂四、操作步骤剂量设计改进寇氏法
1、剂量设置：雌雄，等比数级，灌胃容量：0.1ml/10g
雌LD100=240mg/kg,LD0=90mg/kg,k=1.28
雄LD100=250mg/kg,LD0=100mg/kg,k=1.26
㈠雌性5个剂量组各组浓度㈡雄性5个剂量组各组浓度
240mg/Kg24mg/ml250mg/kg25mg/ml
187.5mg/Kg18.8mg/ml198.4mg/kg19.8mg/ml
146.5mg/Kg14.7mg/ml157.4mg/kg15.7mg/ml
114.4mg/Kg11.4mg/ml125.0mg/kg12.55mg/ml
90mg/Kg9mg/ml100mg/kg10mg/ml
各组浓度＝各组剂量/灌胃容量
例雌性最高剂量组浓度＝最高剂量/灌胃容量＝240mg/kg/0.1ml/10g＝24mg/ml
2、每组实际需要量V＝最终体积＋损耗量
＝动物数×平均体重×灌胃容量＋损耗量
＝10×25g×0.1ml/10g+2.5ml
＝5ml
3、雌性最高剂量组溶液(即母液)：雄性最高剂量组溶液（母液）：
24mg/ml配置22.9ml25mg/ml配制24.2ml
雌A＝V*K/(K-1)雄A=V*K/(K-1)
＝5*1.28/(1.28－1)=5*1.26/(1.26-1)
＝22.9ml=24.2ml
4、下一组溶液的配置：等比稀释法A*（1/K）
雌性=A×（1/k）=22.9×(1/1.28)=17.9ml
雄性=A×（1/k）=24.2×(1/1.26)=19.2ml
从最高剂量组溶液Aml中取出5ml,作为高剂量组。剩余(A-5)ml,加油5ml，混匀后，
再从中取出5ml作为下一个剂量组，依次类推，完成时，最低剂量组体积为A，
其余各组体积均为5ml.
经口染毒中毒体征和动物死亡情况观察
1、中毒过程：潜伏期、中毒期、恢复期或死亡时间（只需记录中毒出现的时间＆死亡时间）
2、中毒症状：参照《毒理学基础》P123，表6-1
3、死亡的判断：呼吸、心跳停止，瞳孔扩散
4、尸体的解剖：目的判断发生毒作用的靶器官，排除动物的意外死亡

★急性毒性实验原始记录（14天）
受试物名称：敌敌畏受试物性状：乳油受试物来源：毒理实验室
动物种属品系：小鼠，昆明种动物来源：同济医学院实验动物中心
染毒途径：经口灌胃室温：日期：★LD50的计算结果的计算与分析
计算公式：m=lgLD50＝Xk－i（∑p－0.5）

Sm=

式中Xk：最大剂量的对数值
q：存活率
∑p：各剂量组死亡率总和
n：各组动物数
Sm：标准差
i:相邻两剂量组之对数剂量差值

lgLD50及95%可信区间=m±1.96*Sm
反对数求出LD50及95%可信区间
LD50：注明动物种属，品系，性别，途径，受试物纯度
级别LD50的意义实习报告要求1、说明受试物的基本情况（名称、纯度、状态等）和配制方法；
2、实验动物的种属、级别。实验前动物禁食情况和健康状况；
3、染毒剂量（两人小组）和动物分组，体重范围；
4、染毒时间，染毒持续时间，染毒后动物中毒的主要表现、死亡情况及发生时间；
5、按剂量组列表说明每组动物数、性别、出现毒效应的动物数、死亡动物数；(雌雄大组）
6、确定LD50的方法；
7、LD50及其95%可信限的计算和结果；
8、受试物的毒性分级依据、毒性级别。
9、各组死亡数没有剂量效应关系的原因分析
平均体重