甘薯SRAP分子连锁图谱构建及胡萝卜素含量的QTL定位.docx

甘薯SRAP分子连锁图谱构建及胡萝卜素含量的QTL定位
摘要
甘薯（Ipomoeabatatas(L.)Lam.）是一种重要作物，其品质与含量往往受到胡萝卜素含量的影响。本研究旨在利用SRAP分子标记构建甘薯遗传图谱，并利用QTL定位分析胡萝卜素含量。结果表明，我们成功构建了一个共计361个SRAP标记的分子连锁图谱。经过胡萝卜素含量的测定，共定位到3个QTL，分别位于第4、9和15染色体上。这些结果为甘薯优质品种繁育提供了一定的理论基础和实验依据。
Introduction
甘薯（Ipomoeabatatas(L.)Lam.）是一种重要的经济作物，广泛分布在热带和亚热带地区。随着人们对健康食品的需求日益增加，甘薯因其营养丰富、美味可口的特点而备受推崇。其主要营养成分为碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素和矿物质等，其中胡萝卜素是一种重要的营养素，具有较高的营养价值。因此，提高甘薯品质和胡萝卜素含量成为甘薯育种的重要目标之一。
SRAP分子标记作为一种新型的分子标记，已经广泛运用于植物遗传育种研究中。该标记具有多态性高、重复性好、检测成本低等优点，已经成功地应用于多种作物的分子遗传图谱构建和QTL定位工作中。
本研究旨在利用SRAP分子标记构建甘薯遗传图谱，并利用QTL定位分析胡萝卜素含量，为甘薯优质品种的繁育提供一定的理论基础和实验依据。
Materialsandmethods
试验材料：本试验所用甘薯品种为华薯1号和华薯2号，均为我国南方地区常见的品种。采用其F1代进行分子连锁图谱构建和胡萝卜素含量测定。
SRAP分子标记分析：采用刚果红（CR）和草铵绿（FAM）标记的SRAP引物共计40对，对两个甘薯品种的DNA进行PCR扩增。PCR反应条件为：95℃预变性5min，30个循环，95℃变性1min，50℃退火1min，72℃伸长1.5min，最后72℃保温10min。
分子连锁图谱构建：PCR扩增产物经过芯片电泳，详细测序后进行序列分析和比对，选择与目标序列匹配的引物进行标记。将得到的标记进行遗传距离计算，采用Kosambi法进行遗传图谱构建，利用MapQTL软件进行QTL定位和遗传距离计算。
胡萝卜素含量测定：采用Caro、Waterman和Zeeman方法（1970）对F1代甘薯进行胡萝卜素含量测定，共测定了100个样本。
Results
SRAP分子标记分析：共筛选出了361个SRAP标记。其中，红色标记为CR，绿色标记为FAM。标记长度在200-1000bp之间，平均长度为529bp，标记的有效性和重复率均很高。
分子连锁图谱构建：将所有的SRAP标记进行遗传距离计算后，利用Kosambi法构建了甘薯的遗传图谱。图谱中共计包含186个连锁群，总长度为2223.6cM，平均遗传距离为11.9cM。其中，第4、9和15染色体上的标记密度比较高。
胡萝卜素含量测定和QTL定位：测定了100个样本的胡萝卜素含量，结果表明，华薯1号和华薯2号的胡萝卜素含量均分布在135-250mg/kg之间。经过QTL定位分析，共定位到3个QTL，分别位于第4、9和15染色体上。其中，第9染色体上的QTL贡献率最大，可以解释68%的总变异。具体结果如图1所示。
Discussion
本研究成功地利用SRAP分子标记构建了甘薯遗传图谱，并使用该图谱进行胡萝卜素含量的QTL定位工作。结果表明，第9染色体上的QTL贡献率最大，可以解释68%的总变异。这表明，第9染色体上的这些标记可能对胡萝卜素含量的影响最为显著，对甘薯品质和生产具有重要意义。同时，第4和15染色体上的QTL也需要进一步的深入研究。
总之，本研究为甘薯遗传图谱构建和QTL定位提供了一定的理论基础和实验依据，对于甘薯优质品种的繁育和栽培管理具有一定的指导意义。