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天然产物中抗氧化活性成分的高速逆流色谱分离研究
天然产物中抗氧化活性成分的高速逆流色谱分离研究
摘要：
天然产物中的抗氧化活性成分已成为近年来研究的热点之一。高速逆流色谱（HSCCC）是一种新型分离技术，具有分离效率高、选定性强、操作简便等优点，在天然产物中的分离和纯化中广泛应用。本文以寒天为支撑溶液，对夏枯草中的抗氧化活性成分进行HSCCC分离，通过对实验结果的分析，得出了一些结论，为进一步深入研究天然产物中的抗氧化活性成分提供了参考。
关键词：高速逆流色谱，天然产物，抗氧化活性成分，夏枯草
Introduction：
随着人们生活质量的提高，人们对于天然营养成分的需求逐渐增加。天然产物中的抗氧化活性成分具有很高的价值，因为其能够有效地抑制自由基的活性，从而防止细胞衰老和疾病的发生。因此，研究天然产物中的抗氧化活性成分已成为近年来研究的热点之一。高速逆流色谱（HSCCC）是一种新型分离技术，具有分离效率高、选定性强、操作简便等优点，在天然产物中的分离和纯化中广泛应用。本文以夏枯草中的抗氧化活性成分为例，利用HSCCC进行分离和纯化，对天然产物中的抗氧化活性成分进行深入研究。
MaterialsandMethods：
（1）实验材料：夏枯草。
（2）实验仪器：高速逆流色谱仪、离心机、电子天平、紫外分光光度计。
（3）实验方法：
①预处理：将夏枯草粉末加入少量的乙醚中，混合均匀后，用离心机离心10min，将上层液体取出，加入等量的甲醇中，再用离心机离心10min，将上层液体取出，待用。
②准备支撑液：将5g寒天粉加入250mL水中，加热至完全溶解，冷却后，用×40倍的草酸调节pH值为5.5。
③液液萃取：将步骤①中的上层液体加入等量的石油醚中，混合均匀，重复3次。取出每次重复后的石油醚液体，合并，加入2倍的甲醇中，混合均匀后用离心机离心10min，将上层液体取出。
④准备样品溶液：将步骤③中的上层液体加入水中，稀释到10mg/mL浓度。
⑤HSCCC分离：将样品溶液和支撑液按1:1的比例混合均匀，通过高速逆流色谱进行分离，分离后收集每个峰的样品溶液，测定其抗氧化活性，并进行质谱分析和核磁共振分析。
Results：
为了确定在导出液相流行的抗氧化成分，利用高效液相色谱-ABTS自由基清除研究结果，通过HSCCC制备了分离和纯化方法。使用5g寒天饱和支撑液，样品和制备好的支撑液1:1混合，并加热溶解获得了清亮的样品溶液，该溶液使用HSCCC进行分离和纯化。结果显示，HSCCC可用于夏枯草中抗氧化活性成分的分离和纯化。根据高效液相色谱-ABTS自由基清除和LC-MS分析，分离得到了更多的清除自由基作用的成分，这些分离的成分具有消除自由基活性和协同效应，从而可以有效防止DNA氧化。
Conclusion：
通过对夏枯草中抗氧化活性成分的分离和纯化，本文研究了HSCCC在天然产物中分离和纯化抗氧化活性成分的应用，并证明了其有效性。结果表明，HSCCC技术可以产生高纯度的抗氧化活性成分，并有望用于天然产物的分离和纯化领域。虽然本文只是对夏枯草进行分离和纯化研究，但这一方法也适用于其他天然产物的分离和纯化，因此对于天然产物中的抗氧化活性成分的研究领域将有积极的贡献。