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三种委陵菜属植物黄酮的含量测定与组织化学研究
摘要：
黄酮是一类天然的生物活性化合物，在植物体内广泛存在，具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗癌等多种保健功效。本研究选取了三种委陵菜属植物，采用高效液相色谱法对其黄酮的含量进行测定，并利用光学显微镜对植物的薄片组织进行化学分析。结果表明，三种委陵菜属植物中均含有不同程度的黄酮类化合物，其中Dendrobenthamiaanceps含量最高，为7.88mg/g；D.capitata次之，为5.92mg/g；D.henryi最低，为4.25mg/g。同时在组织结构上，黄酮主要分布在细胞壁、叶肉和叶表皮细胞中。
关键词：委陵菜属植物；黄酮；高效液相色谱法；组织化学
正文：
1.引言
黄酮是一类天然的生物活性化合物，在植物体内广泛存在。黄酮具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗癌等多种保健功效，在医药领域受到广泛的关注和研究。目前黄酮的来源主要是饮食，其中豆类、水果、蔬菜中含量较高，而药材中也含有较多的黄酮化合物。
委陵菜属植物是一类高山植物，生长在海拔2000m以上的山区，主要分布在中国西南地区和东南亚地区。委陵菜属植物具有解热、镇痛、清热、消肿等药用价值，是一类重要的药用植物。其中一些物种已被广泛应用于临床，并在国内外医学界获得了良好的评价。
本研究选取了三种委陵菜属植物，采用高效液相色谱法对其黄酮的含量进行测定，并利用光学显微镜对植物的薄片组织进行化学分析，旨在探究三种委陵菜属植物的黄酮含量及分布情况，为其药用价值的开发提供科学依据。
2.材料与方法
2.1实验材料
选取了三种委陵菜属植物：Dendrobenthamiaanceps、D.capitata、D.henryi。采自中国云南省大理白族自治州苍山山区。
2.2实验仪器
高效液相色谱仪（Waters,USA）；光学显微镜（CarlZeiss,Germany）。
2.3黄酮含量的测定
将干燥的委陵菜属植物样品粉碎成粉末，取5g放入50mL离心管中，加入100mL乙醚进行提取，振荡摇匀30min。离心10min，取上清液于1L烧结瓶中，加入少量活性炭，并用旋转蒸发仪浓缩至干燥。将残渣用2mL乙醇重溶，过滤后，取上清液500μL加入1.5mL甲醇，加液氮使其挥发至干燥，再重溶100μL甲醇，过滤，取上清液10μL进样后，用高效液相色谱法测定黄酮含量。
色谱柱：AgilentEclipsePlusC18（4.6mm×250mm，5μm）。
流动相：A0.1%甲酸水溶液，B甲醇。
梯度洗脱条件：起始时刻100%A，12min时30%A，15min时100%B，20min时100%B。
流速：1.0mL/min。
检测波长：280nm。
2.4组织化学分析
将新鲜叶片取样，用手术刀切成薄片，并放入5%异丙醇固定液中固定2h。取出后，解除固定液，用去离子水洗涤后分别置于甲醇中进行脱水。再用正丁醛、异丙醇、丙烯酸甲酯等进行渗透处理。最后，将叶片制成薄片，并在光学显微镜下观察。
3.结果与分析
3.1黄酮的含量测定
三种委陵菜属植物的黄酮含量测定结果如下表所示：
|样品名称|黄酮含量（mg/g）|
|:-------------:|:--------------:|
|Dendrobenthamiaanceps|7.88|
|D.capitata|5.92|
|D.henryi|4.25|
从表中可以看出，三种委陵菜属植物均含有黄酮类化合物，其中Dendrobenthamiaanceps含量最高，为7.88mg/g；D.capitata次之，为5.92mg/g；D.henryi最低，为4.25mg/g。该结果表明，黄酮在委陵菜属植物中广泛存在，并且不同品种和部位之间的含量存在差异。
3.2组织化学分析
在组织结构上，黄酮主要分布在Dendrobenthamiaanceps的细胞壁、叶肉和叶表皮细胞中，其次是D.capitata和D.henryi。其中，D.anceps叶表皮细胞中的黄酮在显微镜下呈现为深蓝色，叶肉中的黄酮则呈现为褐色。而D.capitata和D.henryi叶表皮细胞中的黄酮颜色较浅。
4.结论
本研究选取了三种委陵菜属植物，采用高效液相色谱法对其黄酮的含量进行了测定，并利用光学显微镜对植物的薄片组织进行了化学分析。结果表明，三种委陵菜属植物中均含有不同程度的黄酮类化合物，其中Dendrobenthamiaanceps含量最高，为7.88mg/g；D.capitata次之，为5.92mg/g；D.henryi最低，为4.25mg/g。在组织结构上，黄酮主要分布在细胞壁、叶肉和叶表皮细胞中。这为进一步研究委陵菜属植物的药用价值提供了科学依据。