天麻素诱导脐血间充质干细胞分化为神经元样细胞实验研究.pptx

天麻素诱导脐血间充质干细胞分化为神经元样细胞实验研究天麻素诱导脐血间充质干细胞一、选题目的、思路和意义脐血间充质干细胞分化能力强，原材料-脐血采集方便，应用不受伦理、法律限制。二、研究进展研究证明多种抗氧化中药具有诱导间充质干细胞向神经干细胞分化的作用。

天麻素具有抗氧化作用，安全、毒副作用小，有望成为新一代的干细胞分化诱导剂。
二、立题依据（一）中医理论依据(二)现代医学理论研究2、脐血间充质干细胞的鉴定
脐血间充质干细胞（UBMSCs）表面标志抗原主要包括SH2、SH3、CD29、CD71、CD90、CDl05、CDl20a、CDl24、CD105、CDl66等，而CD34、CD45、CDl4、CDllb、CDl33等造血细胞表面标志为阴性。
本实验中采用流式细胞仪CD45、CD29、CD54、CD33、CD105、CD166,从而对脐血对分离扩增后的脐血间充质干细胞进行鉴定。3、神经干细胞的鉴定
巢蛋白（Nestin）是目前鉴定神经干细胞应用最广泛的一种标志物，它是中间丝蛋白的一种，存在于干细胞、反应性星形细胞中。
神经元特异性烯醇化酶（NSE）为烯醇化酶的同工酶，特异性地存在于神经元中，是神经干细胞成熟的标志。
胶质纤维酸性蛋白(GFAP)为星形胶质细胞特异性产生的蛋白。

四、实验设计方案和技术路线附表：分组
按照诱导剂的不同分为4组
A组不添加诱导剂；
B组加入天麻素20μl/L；
C组添加以含30μmol/L全反式维甲酸(RA)、成纤维生长因子(bFGF)10ug/L的培养液诱导；
D组添加天麻素20μmol/L、RA30μmol、10ug/LbFGF。
附表：实验评估
1）形态学观察：倒置显微镜下，动态观察诱导前后UBMSCs形态学变化。
2）免疫组化方法检测：巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白
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