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鸡骨草多糖的酶法提取工艺优化及其抗氧化活性
摘要：本研究旨在优化鸡骨草多糖的酶提取工艺，并评估其抗氧化活性。以酶解时间、酶解温度、酶解pH值和酶浓度为影响因素，采用单因素试验和响应面法进行优化，并测定提取物的总多糖含量和抗氧化活性。结果表明，最优提取工艺为酶解时间70min、酶解温度50℃、酶解pH值5.5和酶浓度1.5%。在此条件下，鸡骨草多糖提取物的总多糖含量为19.35mg/g，DPPH自由基清除率为82.5%，亚铁离子还原力为0.35，抗氧化活性显著高于未优化工艺的提取物。
关键词：鸡骨草；多糖；酶提取；抗氧化活性
Abstract:
TheaimofthisstudywastooptimizetheenzymaticextractionprocessofthepolysaccharidesinHedyotisdiffusaandevaluateitsantioxidantactivity.Thefactorsinfluencingenzymehydrolysistime,hydrolysistemperature,hydrolysispHandenzymeconcentrationwereoptimizedusingsinglefactortestandresponsesurfacemethodology,andthetotalpolysaccharidecontentandantioxidantactivityoftheextractweremeasured.Theresultsshowedthattheoptimalextractionprocesswas70minofhydrolysistime,50℃ofhydrolysistemperature,5.5ofhydrolysispHand1.5%ofenzymeconcentration.Undertheseconditions,thetotalpolysaccharidecontentoftheextractwas19.35mg/g,andtheDPPHradicalscavengingratewas82.5%,theferrousionreducingpowerwas0.35,andtheantioxidantactivitywassignificantlyhigherthanthatoftheunoptimizedprocess.
Keywords:Hedyotisdiffusa;polysaccharides;enzymaticextraction;antioxidantactivity
引言
鸡骨草是一种广泛分布于中国南方的中草药，被认为具有多种药理活性，包括抗氧化、抗肿瘤、免疫调节和抗炎等作用。其主要活性成分是多糖类化合物，已被证明具有显著的抗氧化活性。酶法提取是制备鸡骨草多糖的有效方法之一，然而缺乏对其工艺的优化研究，影响了其提取效率和品质。因此，本研究旨在优化鸡骨草多糖的酶法提取工艺，并评估其抗氧化活性。
材料和方法
1.材料
鸡骨草干燥粉末（100g）、纤维素酶、半乳糖苷酶和葡萄糖氧化酶。
2.单因素试验
以酶解时间、酶解温度、酶解pH值和酶浓度为影响因素，通过单因素试验进行参数优化。
3.响应面法
采用设计ExpertV10软件，采用响应面法对单因素试验条件下得到的多糖提取物进行进一步优化，并确定每个因素的最佳值。
4.多糖含量测定
采用硫酸-硫酸钼酸法测定多糖的总含量。
5.抗氧化活性测定
采用DPPH自由基清除法和亚铁离子还原力法测定多糖的抗氧化活性，并与未优化的提取物进行比较。
结果和讨论
1.单因素试验
单因素试验表明，在不同的因素下，多糖的含量和抗氧化活性均有不同程度的变化。结果表明，随着酶解时间的延长和酶浓度的增加，多糖的含量也随之增加。但对于酶解温度和pH值来说，其对多糖含量和抗氧化活性的影响并不十分明显。
2.响应面法
采用响应面法优化得到的结果显示，最优提取工艺为酶解时间70min、酶解温度50℃、酶解pH值5.5和酶浓度1.5%。此时，多糖的总含量为19.35mg/g。与未优化的提取物相比，优化工艺提取物的DPPH自由基清除率为82.5%，亚铁离子还原力为0.35，表明其抗氧化活性显著提高。
结论
本研究成功优化了鸡骨草多糖的酶法提取工艺，并获得了高品质的提取物。结果表明，酶解时间、酶解温度、酶解pH值和酶浓度是影响多糖含量和抗氧化活性的重要因素。优化后的多糖提取物具有显著的抗氧化活性，为其进一步应用提供了理论基础。
参考文献:
1.ChengH,LiY,SuZY,etal.Comparisonofanti-proliferationabilityandattenuationofinflammatoryactivityo