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蛋白质的分离纯化ppt课件.ppt
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蛋白质的两性电离蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外，氨基酸残基侧链中某些基团，在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。蛋白质的等电点(isoelectricpoint,pI)当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。蛋白质的胶体性质+蛋白质的紫外吸收等电聚焦电泳（isoelectricfocusing，IEF）双向凝胶电泳two-dimensionalelectrophoresis层析(chromatogr
2024-10-19
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蛋白质分离纯化蛋白质的分离纯化样品的前处理蛋白质的分离方法根据蛋白质的溶解度差异分离—沉淀技术可逆沉淀：等电点沉淀、盐析法、有机溶剂沉淀不可逆沉淀：热变性沉淀、重金属盐沉淀、有机酸沉淀1、根据溶解度不同（2）等电点沉淀法1）pH偏离pI时，蛋白质带相同符号的净电荷而互相排斥→蛋白质溶解度大。2）pH=pI时，蛋白质的净电荷为0→蛋白质聚集沉淀3）等电点沉淀法的缺点：沉淀不完全。2、根据分子大小不同透析——只用于除盐类和小分子杂质透析——只用于除盐类和小分子杂质2）超滤（ultrafiltration）：是
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蛋白质分离、纯化主要依据（一）材料1、选材2、破碎3、混合物的分离（二）粗分级（三）细分级采用简单的实验技术手段，比如盐析、等电点沉淀、透析、超速离心等对蛋白质粗提取液进行初步分离纯化，经浓缩后得到蛋白质粗制品。一、盐析盐析：蛋白质在高浓度中性盐溶液中会沉淀析出。常用硫酸铵进行沉淀。分级沉淀：通过调节硫酸铵的浓度可以使不同的蛋白质分阶段沉淀下来。二、有机溶剂分级沉淀有机溶剂如甲醇、乙醇、丙酮等（保持低温），能破坏蛋白质的水化层，使蛋白质的溶解度降低而沉淀。优点：蛋白质沉淀不用脱盐、有机溶剂去除容易。缺点：
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蛋白质分离与纯化技术一般程序预处理蛋白质的抽提蛋白质粗分级蛋白质纯化蛋白质纯化的常用方法根据分子大小不同的分离方法利用溶解度差别的分离方法根据蛋白质的吸附性质分离根据对配体的特异亲和力进行纯化根据蛋白质带电状态分离小结THANKYOU！
2024-10-22
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基因工程下游技术简介下游工艺的大体步骤细胞扩增细胞破碎离心分离（溶解包涵体）层析分离（离子交换层析反相层析疏水层析凝胶层析亲和层析等）发酵工程主要指利用微生物、包括利用基因工程改造的微生物在全自动发酵罐或生物反应器中大量扩增的技术。现代发酵工程是生物代谢、微生物生长动力学、大型发酵罐或生物反应器研制、化工原理等密切结合和应用的结果。4动物细胞培养6细胞破碎方法2.物理法：1)反复冻融法：将细胞冷至－15℃到－20℃，然后放于室温(或40℃)迅速融化，如此反复冻融多次，由于细胞内形成冰粒使剩余胞液的盐浓度增
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