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碎米荠蛋白制备工艺及抗氧化活性
一、引言
碎米荠（LepidiumsativumL.）是十字花科碎米荠属植物，是一种营养丰富的蔬菜和药用植物。其中蛋白质含量较高，具有多种生理活性。本文旨在制备碎米荠蛋白，研究其抗氧化活性并探讨制备工艺。
二、制备工艺
1.原料处理
选择新鲜、干净、无病虫害的碎米荠为原料，去掉根部和坏叶，洗净，切成小块备用。
2.蛋白提取
将碎米荠小块放入研钵中加几滴盐水混合研磨，使其变为混浆状，然后将混浆煮沸5-10分钟，待冷却后过滤离心，得到蛋白液。蛋白液经过乙醇沉淀、离心、洗涤、干燥后可得到碎米荠蛋白粉。
3.碎米荠蛋白的分离纯化
将得到的碎米荠蛋白粉溶于适量的缓冲液（如0.1M的磷酸盐缓冲液pH7.4），经过离心、过滤，得到蛋白悬液。利用弱阳离子交换层析柱对蛋白进行分离纯化。
4.蛋白质浓缩
将分离纯化后的蛋白质溶液通过超滤和浓缩，使蛋白浓度达到所需浓度。
三、抗氧化活性的研究
1.DPPH自由基清除能力测定
采用DPPH方法测定碎米荠蛋白对自由基DPPH清除能力。将0.1mL蛋白质溶液与0.1mMDPPH溶液混合，静置反应20分钟后，测定吸光度。用抗坏血酸（VC）作为对照，计算样品与对照之间的抗氧化活性。
2.玫瑰花酸清除能力测定
利用玫瑰花酸的分光光度法测定碎米荠蛋白对玫瑰花酸氧化抑制作用。将2mL蛋白质溶液加入2mL10mM玫瑰花酸，4mL0.1M磷酸盐缓冲液（pH6.5）混合后，加入0.5mLH2O2，测定吸光度。计算抑制率。
四、结论
碎米荠蛋白具有一定的抗氧化活性，其抗氧化性能与常见的天然抗氧化剂如VC相比略低。制备碎米荠蛋白粉的最佳工艺流程为：小块碎米荠经过煮沸、过滤、乙醇沉淀、离心、洗涤、干燥等步骤制备碎米荠蛋白粉，然后进行分离纯化和浓缩。碎米荠蛋白可应用于食品中保持稳定性、延长保质期，还可应用于医药领域防止自由基的损害。