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植物基因工程通过植物基因工程获得转基因植物在农业生产发展及植物分子生物学研究中有十分重要的意义,已获得的有重大经济价值的转基因植物已经很多。进行植物转化的方法也在不断创新。从目前看,大体上可分为三类:农杆菌介导的基因转移 以原生质体或细胞(组织)作为受体的直接基因转移,如: 聚乙二醇法(PEG)电击(EP,electroporation) 脂质体(Lip,Lome)磷酸钙-DNA共沉淀(Ca-P) 微注射(Mi,Microinjection) 基因枪法(particlebombardment,简称PB) 超声波法(Ulstrasonication) 种质系统(germlinetranstormation)的基因转移,如利用子房注射、种胚以及花粉管通道等导入外源基因在当今众多的植物基因转化技术中,最为可靠和有效的方法之一是农杆菌Ti质粒介导的外源基因转化系统。这是一个本来就存在于自然界的“天然”的基因工程系统。随着人们对其机理的揭示,使人们得以利用其进行植物的定向转化―把有益基因转入植物,成为可能。目前,人们对这一天然过程已有了较深入地了解,对其基因组织、结构、遗传功能,表达调控的研究不断深入。其基因(T-DNA)的转移,是一个极为复杂而又巧妙的生物学过程。它涉及到生物分子间识别、信息传递、蛋白质激活、基因表达调控、生物大分子输入转移等一系列分子及细胞生物学过程,尽管有很多问题还有待深入研究、而还有很多问题不断出现,但利用它进行植物基因转移已成为可能,并有很多成功的实例。植物基因工程1.1冠瘿瘤冠瘿瘤1.1.3冠瘿瘤的一般生物学特性1.2Ti质粒1.2Ti质粒1.2Ti质粒1.2Ti质粒1.2Ti质粒1.2Ti质粒1.3T-DNA1.3T-DNA1.3T-DNA1.4Vir区的基因结构与功能1.4Vir区的基因结构与功能1.5农杆菌Ti质粒基因转化机理1.5农杆菌Ti质粒基因转化机理1.5农杆菌Ti质粒基因转化机理1.5.2VirA和VirG结构性表达1.5农杆菌Ti质粒基因转化机理1.5农杆菌Ti质粒基因转化机理T—DNA的复制1.5农杆菌Ti质粒基因转化机理VirB蛋白T复合体经VirB通道输出示意图1.5农杆菌Ti质粒基因转化机理2.植物基因工程中Ti载体及其构建2.1植物基因工程载体命名规则2.2植物基因工程载体种类2.2植物基因工程载体种类2.2植物基因工程载体种类2.3.1卸甲载体2.3.2共整合质粒2.3.3双元载体2.3.4载体盒2.4.1标记基因必须具备的条件3.植物基因转化受体系统3.植物基因转化受体系统3.1植物基因转化受体系统的条件3.2植物基因转化受体系统的类型植物基因转化受体系统的建立程序常遇到的问题4.根癌农杆菌转化程序5.植物病毒介导的基因转化5.植物病毒介导的基因转化病毒载体和质粒载体的比较