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临床输血与检验一、RBCABO血型判定 二、RBCRh血型判定一、ABO血型判定(一) (一)待检血浆和待检5%RBC悬液配制两人一组 1.待检血浆制备(反定型用) (1)放血:选择血多未溶血贮血管,剪两端,将血 于小试管中,编号。 (2)离心:rpm×3min。 (3)吸收血浆:塑料滴管、滴管保留。 2.5%RBCNS悬液制备(正型用) (1)洗涤RBC:在上(3)RBC试管中加等VNS,混匀。 (2)离心:rpm×3min。 (3)配制5%RBC悬液:滴1滴RBC于洁净小试管底部 (悬空),加NS14滴(滴管放在试管中),混匀。(二)RBOABO判定(试管法:正定型) 【试剂】标准抗A、抗B标准血清(商品)、NS 【操作】 1.标识 2.加已知抗血清各管加1滴对应抗A、抗B抗体 3.加待检5%RBC各管分别加1滴待检5%RBC 4.离心混匀,1000rpm×1min。 5.观察结果显微镜 6.判断结果 7.汇报结果ABO血型定型(试管法:反定型): 【注意】器材、试剂、标本、操作、生物安全(三)RBCABO判定(试管法:反定型) 试剂:5%A型和B型RBC标本:待测血清或血浆 操作:标识;加血清;加RBC;混匀;离心;观 察结果、判断结果 试验二、红细胞血型判定(二)二、RhD抗原判定 1.试剂单克隆抗D(IgG+IgM)试剂 2.标本5%待检RBC(自己) 3.方法盐水介质(试管法) 4.操作程序 取小试管1支;标识;加抗D试剂1滴;加5%RBC 混匀;离心;观察结果;汇报结果: Rh血型判定(盐水介质法)D抗原性。 5.注意试验汇报 试验一血型判定(一) RBCABO血型判定(一) 一、盐水介质试管法(正定型) 1、操作程序 标本制备、标识、加抗血清、加待测RBC、混 匀、离心、观察结果、判断结果、汇报结果。 2、结果汇报 RBCABO血型判定(试管法:正定型): 3、注意事项二、盐水介质试管法(反定型) 1、操作程序 标本制备、标识、加抗血清、加待测RBC、混 匀、离心、观察结果、判断结果、汇报结果。 2、结果汇报 RBCABO血型判定(试管法:反定型): 3、注意事项试验二、RBC血型判定(二) 综合 一、RBCABO血型判定(二)玻片法 1、操作程序 2、结果汇报 3、注意事项 二、RBCRhD抗原判定 1、操作程序 2、结果汇报 3、注意事项主要内容 一、ABO血型判定 二、Rh血型判定 1.试剂Wright染色 (1)瑞氏染液:亚甲蓝+伊红+甲醇 (2)姬氏染液: 2.标本血涂片 3.染色 (1)放置血片:平放 (2)加瑞氏染液:覆盖血膜染色(量) (3)固定:1min。 (4)加姬氏染液:等量(防干、时间)。 (5)混匀、染色:5-10min (6)洗片:流水冲洗染料主要内容 一、血细胞计数板使用(显微镜) 二、皮肤采血 三、WBC形态识别(有时间) 改良牛鲍血计数板 厚质玻璃板:分上、下2个计数室,两侧各 有1条支柱,比计数室高0.1mm,盖上盖玻片, (24mm×20mm×0.6mm)形成0.1mm缝隙。 计数室结构: 各边长为3mm, 分为9个大方格, 其中四角大方格 分为16个中方格 (单线)血细胞计数板计数标准血细胞计数板计数标准3.操作 (1)采血、取血:20ul (2)WBC稀释液稀释:0.38+20ul (3)计数板准备:洁净,放置(板和盖) (4)充池:量、气泡、连续充池。 (5)显微镜计数 1)对光、调光: 2)移板 3)Lp观察:观察计数板结构;找到四角四个大方格中左 上角大方格;WBC形态识别、计数;Hp观察 (光线控制:弱!聚光器、光栅、反光镜)1.器材 (1)采血器材:采血针、酒精棉球、干棉球。 (2)WBC计数:加样器,小试管;Hb吸管;计数板 ,显微镜。 (3)WBC分类:载玻片、盖玻片;显微镜 2.试剂 (1)WBC稀释液 (2)染液3.操作 (1)准备:WBC稀释液(0.38ml);Hb吸管 载玻片、推玻片;计数板及盖片;显微镜 (2)采血: 1)选择部位: 2)消毒、待干: 3)刺针: 4)檫去第一滴血 5)取血、稀释:20ul 6)推片、伤口处理: 7)染色:一、Hb微量吸管使用 为了确保取血准确性,应该注意哪些步骤或问题 二、血涂片制备 (一)操作程序 (二)思索题: 1.影响血涂片制备原因有哪些,是怎样影响? 2.评价一张血涂片制备质量标准有哪些? 三、血涂片染色 (一)操作程序 (二)瑞氏染色原理是什么?注意问题?一、皮肤采血 操作程序(采血、稀释、涂片): 二、血细胞计数板使用及WBC形态识别 WBC计数充池、WBC识别体会? 1.器材采血器材;WBC计数。 2.试剂WBC稀释液 3.操作程序 (1)准备、标识:0.38ml (2)