预览加载中，请您耐心等待几秒...

液相色谱柱的应用与维护.ppt

预览
1/10
2/10
3/10
4/10
5/10
6/10
7/10
8/10
9/10
10/10

亲，该文档总共75页，到这已经超出免费预览范围，如果喜欢就直接下载吧～

下载提示 文本预览

如果您无法下载资料，请参考说明：

1、部分资料下载需要金币，请确保您的账户上有足够的金币

2、已购买过的文档，再次下载不重复扣费

3、资料包下载后请先用软件解压，在使用对应软件打开

高效液相色谱柱发展史液相色谱柱的结构色谱柱选择---不同的基质反相（非极性）键合相 不同链长的烷基（C1~C30）、苯基（氟代苯基、苯丙基、苯基己基等）、等 正相（极性）键合相 硅胶（SiO2）、氨基（NH2）、二醇基（Diol）、氰基（CN）等 离子交换键合相 阳离子交换剂（磺酸基或羧酸基）、阴离子交换剂（季铵基或氨基） 手性键合相 蛋白类，环糊精及其衍生物类、糖类、纤维素类、淀粉类等 等 分离的机理基于极性的分离基于极性的分离基于极性的分离月旭公司反相色谱柱的选择流程基于极性的分离基于电荷的分离基于分子大小的分离色谱柱的参数色谱柱的参数硅胶性质-硅羟基 硅羟基的酸性较大，可与碱性化合物由于静电作用力而牢固的结合，因此含有较多残留硅羟基的填料在分离碱性化合物时容易产生脱尾、变宽、保留延长等现象。 解决方案 加入适当的扫尾剂如三乙胺可以掩蔽残留的硅羟基，使碱性化合物峰形变好 降低流动相pH值小于3,可以减小硅羟基的反应,从而减小拖尾现象 目的 残留的硅羟基影响最小； 碱性化合物不拖尾； 改善选择性； 一般优先使用高封尾的色谱柱； 低封尾或不封尾的C18色谱柱，可用于100%的水相，因为硅羟基的影响，对极性相同的化合物有特殊选择性（LP系列（pH1~8）未封尾）； pH使用范围宽。 不足点 酸性条件下，氢离子通过未封端的Si-OH的间隙进攻-Si-C键，导致填料水解； 封尾的基团会影响色谱柱的使用pH值、对化合物的选择性等； 为什么需要制样？真实世界中的真实样品样品前处理过程中的常用技术与液液萃取相比，SPE的优势多农药残留分析—QuEChERS方法多农药残留分析—QuEChERS方法多农药残留分析—QuEChERS方法多农药残留分析—QuEChERS方法多农药残留分析—QuEChERS方法多农药残留分析—QuEChERS方法地沟油中PAH的检测食品中PAEs的检测奶和奶制品中三聚氰胺的测定奶和奶制品中三聚氰酸的测定蟾酥药材刺五加浸膏浓缩六味地黄丸—马钱苷麻黄药材他克莫司软膏贝前列素钠奥美拉唑（Ch.P.）仪器：伍丰LC-100高效液相色谱仪 色谱柱：Ultimate®LP-C18，4.6×300mm，5μm； 检测波长：280nm； 流动相：1.4g/L磷酸氢二钠用磷酸调节pH到7.6：乙腈=72:28； 温度：30度； 流速：1.0ml/min； 进样量：20μL 物质名称：1、奥美拉唑 2、奥美拉唑黄酰化物 要求两者之间分离度大于3 复方甘草口服液—无水吗啡更昔洛韦利巴韦林原药利培酮片头孢氨苄原药头孢泊肟酯原药日常维护日常维护色谱柱故障柱压高解决方案柱压高解决方案柱压高解决方案柱压高解决方案柱压高解决方案柱压高解决方案柱污染 柱外死体积增大 流动相成分变化 仪器故障 键合相流失 保护柱污染 等常见异常峰形解决方案前延峰：又称前伸峰、伸舌头峰。前沿平缓，后沿陡峭的不对称色谱峰称前延 峰。参数拖尾因子（T）或对称因子来衡量。 解决方案 溶剂效应----强溶剂溶解，流动相稀释 缓冲作用不适合----增加缓冲 仪器系统不匹配----减小系统死体积 柱温太低----适当升高柱温的温度 色谱柱损坏(筛板阻塞和柱头塌陷)----维修色谱柱 色谱柱污染----冲洗色谱柱 等 拖尾峰：前沿陡峭，后沿较前沿平缓的不对称峰。 参数拖尾因子（T）或对称因子来衡量。 解决方案 降低pH----抑制硅羟基电 合适的缓冲能力---更换缓冲盐 增加缓冲作用—增加缓冲盐或加大浓度 屏蔽硅羟基—添加扫尾剂三乙胺 色谱柱损坏(筛板阻塞和柱头塌陷)----维修色谱柱 色谱柱污染----冲洗色谱柱 等 常见缓冲盐的PH值拖尾峰解决方案峰分叉（裂峰）解决方案保护柱或分析柱被固体颗粒阻塞柱头塌陷---更换新柱 基质溶解 装填不当 压力太高 进样溶剂化效应 低浓度进样 流动相溶解样品 等 宽峰/馒头峰保留时间变化柱寿命不理想柱寿命不理想讨论