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非洲菊愈伤组织诱导和再生体系的建立 非洲菊(TageteserectaL.)是一种重要的观赏植物,其品种众多,花色鲜艳美丽。虽然非洲菊在观赏上有着重要的地位,但在生物医药及工业化学中也有着广泛的用途。近年来,越来越多的研究表明,非洲菊含有丰富的次生代谢产物,如生物碱、甾醇、鞣质、皂苷、黄酮类、多糖等。其中,它含有的生物碱被广泛用于生物医药领域,如抗凝血剂、降压药和抗菌剂等。因此,建立非洲菊的愈伤组织诱导和再生体系将为非洲菊的产业化生产提供重要的技术支持。 1.非洲菊的愈伤组织诱导技术 愈伤组织是植物细胞在一定条件下诱导分化为具有再生能力的细胞群体,其特点是同心包裹形状,外层薄而内层较厚,且具有较高的增殖能力。非洲菊的愈伤组织诱导技术是建立愈伤组织诱导和再生体系的前提。愈伤组织诱导技术的主要方法有悬浮细胞、切割培养、体细胞胚胎发生和愈伤组织射线诱导等。在愈伤组织诱导中,感光性物质和激素是关键的影响因素。 (1)感光性物质的作用 感光性物质的光合作用直接影响植物的生长和发育,同时也对诱导愈伤组织有重要影响。目前,琼脂质、乳糖、提取物等物质都被用来作为感光性物质加入培养基中以促进愈伤组织的形成。研究表明,加入0.5g/L的琼脂质、0.01%的乳糖、0.1%的纯种暗红色光滤过液等都能够有效的促进非洲菊的愈伤组织的形成。 (2)激素的应用 激素是非洲菊愈伤组织诱导和再生体系的关键因素,其种类和浓度对愈伤组织的形成和再生发育具有重要影响。早期研究中,各种植物激素,如植物生长素、芍药素、脱落酸、乙烯等,都被用来试验非洲菊愈伤组织的诱导,但效果都不理想。近年来,由于细胞激素合成途径和生理调控机制的深入研究,以及基因工程等新技术的应用,已经成功利用激素体系诱导非洲菊愈伤组织。 2.非洲菊的再生体系建立 非洲菊的再生体系建立主要包括外植体的处理、愈伤组织的诱导、离体培养和转移培养等过程。其中,外植体处理和愈伤组织诱导是建立再生体系的主要环节。 (1)外植体的处理 外植体的处理是建立愈伤组织诱导和再生体系的第一步。外植体的选择、杀菌和分离是外植体处理的基本环节。外植体的选择应注意保证发育健康、生长繁茂、无近亲杂交等;杀菌应注意彻底严密,以保证处理后的外植体不受细菌污染;分离时要注意保证外植体的完整性和纯度。 (2)愈伤组织的诱导 在外植体处理完成后,可以进行愈伤组织的诱导。在诱导过程中,感光性物质和激素的应用方式和浓度是影响愈伤组织诱导效果的关键。经过愈伤组织的诱导和培养后,产生的愈伤组织需要进行穴培养,以保证愈伤组织均匀地生长并避免污染。 (3)离体培养和转移培养 在非洲菊的愈伤组织诱导和再生体系建立过程中,离体培养和转移培养环节相当重要。这一步需要进行无菌培养,保证培养过程中无菌污染,并采取适当的转移方法,以避免愈伤组织的萎缩或死亡。最终,同时需要进行愈伤组织的重构和分化,以建立非洲菊的再生体系。 3.结论 非洲菊是重要的观赏植物,也是生物医药和工业化学中的重要资源。建立非洲菊的愈伤组织诱导和再生体系对于实现非洲菊产业化生产具有重要的应用价值。目前,随着基因工程和生物技术的发展,这一领域的研究也得到进一步深化。但是,非洲菊愈伤组织诱导和再生体系建立的研究仍然处于起步阶段,需要进一步加强研究,以发挥这一领域的应用前景。