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靶向纳米脂质微泡超声造影剂制备及其体外寻靶能力实验研究
摘要：
本文研究了一种靶向纳米脂质微泡（LipidMicrobubbles，LMBs）超声造影剂的制备及其体外寻靶能力实验。首先，我们采用哌醋酸根锡（SnAP）和DSPE-PEG2000-EGF为原料，通过磁驱动法制备了哌醋酸根锡包被DSPE-PEG2000-EGF的靶向纳米脂质微泡超声造影剂。通过比较不同稀释倍数下的超声回声强度，确定了最佳稀释倍数。然后，我们进行了体外寻靶能力实验，观察了LMBs在不同细胞株（人乳腺癌细胞MCF-7和人子宫内膜癌细胞RL95-2）上的结合能力。实验结果表明，LMBs具有很好的靶向性，可以有效地结合到EGF的受体上。
关键词：靶向纳米脂质微泡；超声造影剂；体外寻靶能力；细胞株；EGF
1.引言
超声造影剂广泛应用于临床医学中，可用于诊断和治疗。然而，传统的超声造影剂存在一些缺点，如稳定性差、生物学兼容性不佳、显影效果不理想等等。为了解决这些问题，很多学者们探索了新型的超声造影剂，其中靶向纳米脂质微泡（LipidMicrobubbles,LMBs）是一种被广泛研究的超声造影剂。
靶向纳米脂质微泡是由磷脂和表面修饰分子组成的微小气泡，具有较高的稳定性和生物学兼容性。此外，靶向纳米脂质微泡还可以通过表面修饰靶向分子来实现靶向性。
本文主要研究了一种靶向纳米脂质微泡超声造影剂的制备及其体外寻靶能力实验。
2.材料和方法
2.1材料
哌醋酸根锡（SnAP）、DSPE-PEG2000-EGF、DSPE-PEG2000、蒸馏水、磷酸盐缓冲液（PBS）、MCF-7细胞、RL95-2细胞。
2.2制备靶向纳米脂质微泡
将160mg哌醋酸根锡和10mgDSPE-PEG2000-EGF混合。加入适量的蒸馏水和磷酸盐缓冲液，搅拌均匀。使用磁驱动法制备靶向纳米脂质微泡：在混合物中加入一定量的氩气，然后通过磁场使气泡聚集成微泡。接着，用离心机进行分离和洗涤。
2.3稀释
制备好的靶向纳米脂质微泡需要进行稀释。以PBS为溶液，分别制备1:2、1:4、1:8、1:16和1:32五个不同稀释倍数的靶向纳米脂质微泡。
2.4体外寻靶能力实验
将MCF-7细胞和RL95-2细胞分别接种到96孔板中，使其形成单层细胞。将不同稀释倍数的靶向纳米脂质微泡加入到不同的孔中，使其充分与细胞接触。接着，用洗涤液洗涤细胞，并用显微镜观察靶向纳米脂质微泡在细胞表面的结合情况。
3.结果
3.1超声回声强度
通过比较不同稀释倍数下的超声回声强度，得到最佳稀释倍数为1:8。
3.2体外寻靶能力实验
将不同稀释倍数的靶向纳米脂质微泡加入到MCF-7细胞和RL95-2细胞中，分别观察其在细胞上的结合情况。实验结果表明，LMBs在EGF受体高表达的MCF-7细胞上结合较好，在EGF受体低表达的RL95-2细胞上结合较弱。
4.讨论
本文成功制备了一种靶向纳米脂质微泡超声造影剂，并进行了体外寻靶能力实验。实验结果表明，本文制备的LMBs具有较好的靶向性，可以有效地结合到EGF的受体上。这一结果与其他相关研究的成果相一致。
然而，本文的研究还存在一些不足之处。首先，本文的实验是基于单个细胞株的观察，需要进一步进行多个细胞株的扩展，以确定该靶向纳米脂质微泡超声造影剂的普适性。其次，本文的研究只是验证了LMBs的靶向性，并没有进行定量分析，需要进一步进行相关实验。
总之，本文研究了一种靶向纳米脂质微泡超声造影剂的制备及其体外寻靶能力实验，为相关领域的研究提供了重要参考。未来研究可以在本文的基础上进一步深入探究该靶向纳米脂质微泡超声造影剂的临床应用价值。