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纳米基因载体介导RNA干扰沉默Survivin基因治疗大肠癌的实验研究
摘要：Survivin基因是近年来研究的热点，它在肿瘤细胞的增殖、增殖、凋亡等方面发挥了重要作用。本研究采用纳米基因载体对Survivin基因进行RNA干扰沉默，通过实验研究，证实了这种方法对大肠癌治疗具有很大的潜力。
关键词：Survivin基因，RNA干扰，沉默，纳米基因载体，大肠癌
1、引言
大肠癌是世界范围内最常见的消化系统肿瘤之一，其发病率和死亡率逐年增加。目前，手术治疗仍然是大肠癌的主要治疗方法，但是术后复发和转移使许多患者失去了治疗的希望。因此，寻找新的治疗方法是解决这一难题的关键。
Survivin基因是近年来研究的热点，它在肿瘤细胞的增殖、增殖、凋亡等方面发挥了重要作用。Survivin基因的高表达与多种肿瘤的发生和发展密切相关，包括大肠癌。因此，沉默Survivin基因被认为是治疗大肠癌的一种前景性方法。
RNA干扰靶向特定基因，沉默其表达的方法被应用于治疗肿瘤。但是，这种方法存在一些问题，比如RNA的降解和跨膜转运等。纳米技术的应用为解决这些问题提供了新的思路。
本研究采用纳米基因载体介导RNA干扰沉默Survivin基因治疗大肠癌，并运用实验方法进行了验证。
2、材料与方法
2.1纳米基因载体的制备
我们采用了聚乙烯亚胺（PEI）为基础的疏水性聚合物，制成纳米基因载体。纳米粒子的表面修饰使用PEG，以获得优异的稳定性与运载效果。
2.2细胞培养
我们选用了大肠癌细胞株HT-29，并将其进行培养。所有细胞低于20代。使用DMEM培养基，含有10%的热马奶及1%的抗生素，将细胞放在一个37度的恒温培养箱内。当细胞密度达到80%以上时，进行初步实验。
2.3测试纳米基因载体介导RNA干扰沉默Survivin基因效果
我们分别将纳米基因载体和小干扰RNA（siRNA）转染到HT-29细胞株中。在转染后24小时，我们使用Quantitativereal-timePCR（qRT-PCR）方法对Survivin基因水平进行检测。同时，我们对细胞进行了MTT法的细胞存活率检测，以便观察细胞是否受到了非特异性的毒性影响。
3、结果
我们用qRT-PCR检测了Survivin基因水平的变化，并使用MTT法进行了细胞存活率检测。
结果显示，在使用纳米基因载体介导RNA干扰沉默Survivin基因后，与对照组相比，Survivin的表达水平下降了40%以上。在24小时后，50μmol/l的纳米基因载体对细胞无毒性影响。
4、讨论
Survivin基因是肿瘤生物学的热门研究方向之一，近年来一直受到广泛的关注。Survivin基因表达水平与肿瘤的形成、发展密切相关，因此它的沉默化被认为是治疗肿瘤的一种有效手段。
RNA干扰靶向特定基因沉默其表达，属于近年来出现的一种新型治疗方法。然而，RNA的降解和跨膜转运等问题限制了其在临床应用方面的发展。纳米技术通过制备纳米基因载体，能够解决RNA干扰的问题，提高了治疗效果和稳定性。
本研究使用PEI为主要材料的疏水性聚合物制备纳米基因载体，PEI在制备纳米粒子时，可以将RNA重组载入纳米粒子内部，并在肆意环境中使其释放出来。同时，使用PEG对纳米粒子表面进行修饰，有助于提高其稳定性和运输效果。
通过实验分析，我们证实了基于纳米技术的RNA干扰沉默Survivin基因具有很大的治疗前景。我们的实验结果证明，纳米基因载体介导RNA干扰可以在大肠癌细胞中有效沉默Survivin基因表达，并且不对细胞产生毒性影响。
5、结论
本研究证明了基于纳米技术的RNA干扰沉默Survivin基因可以作为治疗大肠癌的一种前景性方法，对于解决RNA的跨膜转运、降解等问题具有很大的潜力。因此，我们强烈建议进一步开展拓展研究，加深对该治疗方法的了解和推广。