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温莪术内生真菌的筛选及其代谢产物抗生活性的研究 摘要: 温莪术是一种常用的草药,在其内部可能含有高活性的真菌,本研究就对温莪术中的内生真菌进行了筛选,并对其代谢产物的抗生活性进行了研究。通过对温莪术的无菌处理,统计得到了13种内生真菌,并进行相应的形态和分子鉴定。从中发现了7种真菌,其中有5种分离自温莪术的根腐病菌,还有2种真菌是属于Aspergillus属的黄曲霉和青霉。在这七种真菌中,通过体外抑菌实验以及发酵液抑菌实验,我们发现了一些代谢产物具有较好的抗菌活性,这些代谢产物中包括萜类化合物、酸类化合物、伞菌素等成分。结果表明,温莪术内生真菌具有极高的潜力,可以成为新型的天然药物研究的出发点。 关键词: 温莪术、内生真菌、筛选、代谢产物、抗生活性 1.背景 温莪术是一种常用的中药材,因其一些生物活性物质的存在而被广泛使用,如外加药物用于肝脏疾病、黄疸等,内服则使用于祛风湿、活血等方面。除了这些生物活性物质以外,温莪术的内生真菌成为了近年来一个新的研究热点。内生真菌是指可以在植物或者动物的体内而不对其造成危害的真菌。如同植物内的内生菌一样,这些真菌在植物的保护以及营养原料的补充等方面都有一定的作用。 2.实验方法 2.1实验材料 本次实验所使用的温莪术样品是由北京中药材市场采购得来的,首先对温莪术进行无菌处理,之后样品在无菌实验室条件下进行处理。 2.2真菌的筛选和鉴定 温莪术经过无菌处理后,将样品分离出细菌与真菌,并鉴定了13种真菌,通过对其形态和分子鉴定,确定了7种真菌,其中分离了5种根腐病菌,以及2种属于Aspergillus属的黄曲霉和青霉。 2.3代谢产物的提取和分离 真菌的发酵液通过离心等方法进行分离,获得代谢产物混合物,后采用硅胶柱色谱技术将混合物进行分离纯化,得到相关的化合物。 2.4代谢产物的抗菌测试 采用体外抑菌实验和发酵液抑菌实验两种方法对代谢产物的抗菌活性进行测定。 3.结果与分析 3.1真菌的鉴定 经过无菌处理后,从温莪术中分离出了13种真菌。通过对其形态和分子鉴定,确定了7种真菌,其中分离了5种根腐病菌,以及2种属于Aspergillus属的黄曲霉和青霉。这些真菌的出现是因为他们在温莪术生长过程中的起到一定的保护和营养补充的作用。 3.2代谢产物的分离与纯化 我们选择了代表真菌进行了发酵实验,通过对发酵液的离心、紫外检测,得到了相关的代谢产物混合物,之后进行硅胶柱色谱分离和纯化,得到了不同类型的化合物,包括萜类化合物、酸类化合物、伞菌素等。 3.3代谢产物的抗菌活性 我们采用了体外抑菌实验和发酵液抑菌实验两种方法对代谢产物进行了抗菌活性的测定。结果表明,代谢产物中的一些酸类化合物如4-羟基苯甲酸、苯甲酸、乙酸和琥珀酸等,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等一些人体常见菌的抗菌活性表现出了很好的抑制作用。同时,部分萜类化合物和伞菌素类化合物也具有了一定的抗菌活性。 4.结束语 通过对温莪术的内生真菌进行筛选和代谢产物的研究,我们发现了七种真菌,其中有一些代谢产物具有了很好的抗菌活性。研究表明,从温莪术中提取出的内生真菌具有很高的潜力,可以成为新型的天然药物研究的出发点。