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模拟空间环境诱变温莪术内生真菌及代谢产物生物活性研究的中期报告 中期报告 一、研究背景 细胞外环境的变化会直接或间接地影响到微生物的生长、代谢和细胞结构等方面。由于外宇宙环境的特殊性,环境对微生物的影响更为复杂和显著。通过模拟空间环境来诱导微生物发生突变和进化,是一种较为常见的生物技术手段。这种方法可用于寻找新型微生物、合成有价值的生物产物等领域。 温莪术是一种具有多种药理活性的中草药,其中的内生真菌具有很高的研究价值。然而,目前对温莪术内生真菌的研究仅停留在室内同质化培养的层面,难以发掘其潜在的生物活性。因此,本研究旨在通过模拟空间环境来诱变温莪术内生真菌,寻找具有生物活性的真菌株和代谢产物。 二、研究进展 1.样品准备 本研究使用的温莪术内生真菌均来自于江苏某医院采集并分离得到。鉴定后,将真菌培养至稳定期,用含有10%丙酮的复原液保存于零下80℃。为防止退化,每个月进行一次移液和复原。 2.空间环境模拟设备 本研究使用的空间环境模拟设备为自主设计的电磁辐射模拟仪。仪器具有较好的辐射剂量控制和空气流动调节能力,可较好地模拟外宇宙环境。 3.诱变实验 本阶段实验选取了10株温莪术内生真菌,按照涂布法进行辐射诱变。具体操作方法为:将每株真菌菌株悬浮于PBS缓冲液中,涂布于培养皿上。将培养皿置于模拟仪的辐射区域,选择适当的电磁波辐射强度进行辐射,持续时间为24小时。诱变后,将真菌移至含有10%丙酮的复原液中保存,每个月进行一次移液和复原。 4.生物活性筛选 对诱变后的真菌菌株进行生物活性筛选。使用纸片扩展法和平板法进行抗菌试验和抗氧化实验,并根据实验结果筛选出具有生物活性的菌株。 三、下一步工作计划 1.扩大研究规模,选择更多样的温莪术内生真菌菌株,并对辐射强度和持续时间进行优化。 2.对筛选出的菌株进行菌种鉴定、分离、鉴定和代谢产物分离与鉴定,并进一步研究其药理活性。 3.研究辐射诱变后温莪术内生真菌的基因组测序变化,深入探究辐射诱变对基因组的影响。