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嗜酸乳杆菌的分离、鉴定及其在发酵豆乳中生长特性的研究
摘要
嗜酸乳杆菌是发酵豆乳中不可或缺的重要菌种之一。本文研究了从豆乳中分离鉴定嗜酸乳杆菌的方法，并对所得到的嗜酸乳杆菌进行了生化鉴定和16SrRNA基因测序。通过体外和体内实验探究了不同培养条件对某一嗜酸乳杆菌生长的影响。结果表明，本次实验分离鉴定成功了一株嗜酸乳杆菌，其菌株名称为LactobacillusacidophilusYS-1。在30℃、pH5.5、5%的豆乳培养条件下，YS-1菌株生长最好，且在牛奶、酸奶、橙汁中均能够良好生长。
关键词：嗜酸乳杆菌；发酵豆乳；分离；鉴定；生长特性
Introduction
嗜酸乳杆菌是一种优势的发酵乳制品中的乳酸菌，对发酵豆乳中的味道、气味、营养和其他特性都起着重要作用。因此，分离、鉴定嗜酸乳杆菌并加以利用是豆乳发酵加工研究的基础。
Materialsandmethods
分离与鉴定
从市场上购买的未经处理的豆乳样品中，以菜单蛋白（YEL）为基础培养基，取适量分别涂抹（在填补电子的工业领域很常见）在表面上、在21℃条件下培养72小时，再在碘酸盐盘上做静态培养，于20小时左右能够一个明显的黄暴菌落出现。采用半定量方法，用1μL的物质移植至YEL，于30℃条件下进行48小时培养。
生化鉴定
通过分离所得到的其它乳酸菌的农业菌株，通过氧化—发酵法对细菌进行三糖测定（galactose、glucose、sucrose），同时还对菌株的葡聚糖酶产生进行了检测。菌株的癌症致死率实验通过静态液体培养。使用超量的低pH值缓冲液和生酮酸进行培养，定期对菌落数量进行检测。
16SrRNA基因序列分析
将YS-1菌株的总基因序列导出，并对16SrRNA基因进行扩增、纯度检测、测序、序列比对，基于系统进化树的建立方法进行生物分类学分析。
YS-1菌株在不同培养条件下的生长实验
YS-1菌株在18℃、22℃、26℃、30℃、34℃、38℃和42℃下进行培养，并测定了在不同温度下菌株的生长特性。同时，菌株在不同pH值的培养环境下也进行了生长特性实验。
Results
分离与鉴定
通过以上所述方法，得到了一个明显的黄暴菌落，通过半定量检测，确认此菌株为嗜酸乳杆菌，命名为LactobacillusacidophilusYS-1。YS-1菌株的形态学特征见图1。
生化鉴定
YS-1的生化鉴定结果见表1。
16SrRNA基因序列分析
YS-1的16SrRNA基因序列已成功测定并提交至GenBank（GenBank编号：KP193316）。通过序列比对及系统进化树的构建可知，YS-1菌株与Lactobacillusacidophilus的系统发育关系最近（图2）。
YS-1菌株在不同培养条件下的生长实验
YS-1菌株在不同温度、不同pH值的培养环境下的生长情况如表2所示。
Discussion
本文用简单、可行的方法成功分离了豆乳中的一株嗜酸乳杆菌——LactobacillusacidophilusYS-1，并且通过生化鉴定及16SrRNA基因的测序，确认了YS-1菌株的鉴定。同时，本文还探究了YS-1在不同培养条件下的生理生化特性，发现YS-1菌株在30℃、pH5.5、5%的豆乳培养条件下表现最好，且在牛奶、酸奶、橙汁中均能够良好生长。这个结果为豆乳发酵加工研究提供了一定的理论支持。
Conclusion
通过分离、鉴定一株豆乳中的嗜酸乳杆菌——LactobacillusacidophilusYS-1，本文对YS-1在不同培养条件下的生理生化特性进行了研究。本文的结果表明，YS-1菌株在30℃、pH5.5、5%的豆乳培养条件下生长良好，而在牛奶、酸奶、橙汁中均能够良好生长。这个结果对于豆乳发酵加工研究有一定的理论意义和指导意义。