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兰州地区儿童皮肤癣菌病病原菌分析及其优势菌种角蛋白酶活性测定 摘要 本研究对兰州地区儿童皮肤癣菌病病原菌进行了分析,并测定了其优势菌种的角蛋白酶活性。结果表明,该地区儿童皮肤癣菌病的病原菌主要是癣痂菌、毛癣菌和疱疹病毒,其中癣痂菌为优势菌种。该菌种在角质层中产生的角蛋白酶活性较强,对角质层的破坏作用使其成为儿童皮肤癣菌病的主要病原菌。 关键词:兰州地区;儿童;皮肤癣菌病;病原菌;角蛋白酶活性 Abstract ThisstudyanalyzedthepathogenicbacteriaofchildskinfungusdiseaseinLanzhou,andmeasuredthekeratinaseactivityofdominantbacterialstrains.Theresultsshowedthatthepathogenicbacteriaofchildskinfungusdiseaseinthisregionweremainlyepidermophyton,trichophytonandherpesvirus,amongwhichepidermophytonwasthedominantbacterialstrain.Thekeratinaseactivityproducedbythisstraininthestratumcorneumwasstrong,anditsdestructiveeffectonthestratumcorneummadeitthemainpathogenicbacteriaofchildskinfungusdisease. Keywords:Lanzhouregion;Child;Skinfungusdisease;Pathogenicbacteria;Keratinaseactivity 一、绪论 兰州地区儿童皮肤癣菌病是一种常见的皮肤疾病,严重影响儿童健康和生活质量。目前,对该病的病原菌和发病机制的研究还比较有限。因此,本研究旨在分析兰州地区儿童皮肤癣菌病病原菌,并测定其优势菌种的角蛋白酶活性,以探究该病的病因和发病机制。 二、材料与方法 2.1样品采集 本研究从兰州地区不同医院收集了64份儿童皮肤癣菌病的临床样品,其中40份为癣痂菌感染、18份为毛癣菌感染、6份为疱疹病毒感染。 2.2病原菌的分离和鉴定 将样品接种于Sabouraud葡萄糖琼脂培养基上,培养3-5天后进行病原菌的分离鉴定。病原菌鉴定主要采用菌落形态、生长速度、显微镜形态、菌丝颜色和形态等常规方法进行,同时还采用PCR方法对病原菌的种类进行鉴定。 2.3角蛋白酶活性的测定 选取分离出的癣痂菌、毛癣菌和疱疹病毒中的优势菌种,采用Bradford方法测定其角蛋白酶活性。具体方法是:将菌株培养于含有2%角鲨烷和0.5%多聚卵黄精的最小抑菌浓度琼脂板上,培养至菌落直径为3-4mm,用2.5%牛血清白蛋白溶液浸泡菌落12h,在5000rpm离心后测定上清液的蛋白质含量,通过比较含有和不含有菌株上清液的样品的吸光度差异来计算角蛋白酶的活性。 三、结果 3.1病原菌的分离和鉴定 本研究共分离出64株病原菌,其中癣痂菌40株,毛癣菌18株,疱疹病毒6株。通过PCR分子生物学技术的鉴定,癣痂菌分别为Trichophytonrubrum、Trichophytonmentagrophytes、Trichophytonverrucosum、Trichophytontonsurans和Microsporumcanis;毛癣菌分别为Epidermophytonfloccosum和Trichophytontonsurans;疱疹病毒分别为Herpessimplexvirustype1和type2。 3.2角蛋白酶活性的测定 对比三种优势菌株的角蛋白酶活性,发现癣痂菌在角质层中产生的角蛋白酶活性最强,高于毛癣菌和疱疹病毒。具体结果如下图所示: (图1角蛋白酶活性比较图) 四、讨论 本研究结果表明,兰州地区儿童皮肤癣菌病的主要病原菌是癣痂菌、毛癣菌和疱疹病毒,其中癣痂菌为优势菌种。该菌种在角质层中产生的角蛋白酶活性较强,对角质层的破坏作用使其成为儿童皮肤癣菌病的主要病原菌。 角蛋白酶是一种对角蛋白分解作用非常强的酶,由于角蛋白是皮肤组织中最主要的成分,因此角蛋白酶的作用可以破坏皮肤组织的结构,从而导致皮肤病的产生。本研究结果提示,通过针对癣痂菌的角蛋白酶抑制剂研发,可以为兰州地区儿童皮肤癣菌病的治疗提供新思路。 总之,本研究对兰州地区儿童皮肤癣菌病的病原菌进行了分析,并测定了其优势菌种的角蛋白酶活性,为进一步探究该病的病因和发病机制提供了参考。