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一、细菌的形态与结构1.2细菌的基本形态 细菌的外形比较简单,有球状、杆状和螺旋状三种基本类型及某些其他形态。 球菌:按分裂方向及分裂后排列的情况分为双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌等。 杆菌:一般呈正圆形,也有的近似卵圆形,分为长杆菌、短杆菌、双杆菌和链杆菌。 螺旋状菌:菌体呈弯曲或螺旋状的圆柱形,可分为弧菌和螺菌两种。682、细菌的基本结构 细菌细胞均具有细胞壁、细胞膜、细胞质、核体等基本结构。2.2细胞膜 细胞膜位于细胞壁内面,包围在细胞浆的外面,是一层富有弹性的半透性薄膜,主要化学成分是磷脂和蛋白,也有少数碳水化合物和其他物质。 细胞膜主要参与细胞内外的物质转运、交换,维持细胞内正常渗透压,合成细胞壁、荚膜的各组分,着生鞭毛并供应细菌运动所需能量。 细胞膜受到损伤,细菌就会死亡。2.3细胞质 细胞质通常是指细菌细胞膜内包围的、除核体以外的所有物质,是一种无色透明、均质的黏稠胶体。主要成分是水、蛋白质、脂类、多糖类、核糖核酸和少量无机盐等。 细胞质是细菌进行营养物质代谢以及合成核酸和蛋白质的场所。3、细菌的特殊结构 细菌细胞除前面所述的基本结构外,有的还有荚膜、S层、鞭毛、菌毛、芽孢等特殊功能的结构,有些与细菌的致病力有关,也有助于细菌鉴定。4、细菌形态和结构的观察方法 细菌微小,需借助仪器设备放大后才能观察到。常用的方法有:普通光学显微镜观察法、电子显微镜观察法和细菌革兰氏染色法等。革兰氏染色法 原理:细菌经初染和媒染后,细胞膜或原生质上了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阴性菌的细胞壁含脂类较多,当以95%乙醇脱色时,脂类被溶解,而肽聚糖少,且交联疏松,不易收缩,在细胞壁中形成的空隙较大,结晶紫与碘复合物极易被溶解脱出,最后被红色染料复染成红色。革兰氏阳性菌的细胞壁含脂类少,肽聚糖多且交联紧密,95%乙醇作用后肽聚糖收缩,细胞壁孔隙缩小至结晶紫与碘的复合物不能脱出,经红色染料复染后仍为紫色。染色步骤 (1)、涂片 液体培养物:取一环菌液轻轻涂抹在玻片上,制成直径约1cm大小薄层,然后将接种环灭菌 平板培养物:先滴一滴水到玻片上,挑取单菌落细菌涂抹在玻片上,然后将接种环灭菌 17(2)、干燥及固定 涂片置室温自然干燥,必要时可将标本面朝上,放在离火焰较高处微微烘干,但切勿在火焰上直烤,过火后,可用手背试温,以微烫为准 3、染色 初染:结晶紫染色液,2分钟; 媒染:碘液,2分钟; 脱色:95%酒精,30秒; 复染:番红染色液,30秒 不同的产品,染色过程也不尽相同,具体以产品说明书为准。 4、镜检 先在低倍物镜下找准位置,并调整至清晰;在染色的位置滴加松柏油,用油镜观察。2122油镜下模式图 ×1000常见的染色方法主要包括: 复染色法(如革兰氏染色)、负染色法、单染色法、荧光染色法等。二、细菌的生理(3)、细菌对营养的需要比动物细胞更为多种多样; (4)、细菌可利用超常流水线式生产方式合成大分子物质; (5)、细菌能产生诸如肽聚糖、脂多糖、磷酸壁等特殊物质。 细菌代谢过程按功能分为物质摄取、生物合成、聚合作用及组装四个步骤。2、细菌的生长繁殖 细胞新个体的形成导致细菌的生长繁殖,分别体现在个体和群体两方面。 2.1细菌个体的生长繁殖 细菌以二等分分裂法进行无性繁殖。已知大肠杆菌菌体的分裂过程涉及30多个基因的调控。2.2细菌群体的生长繁殖 如将细菌接种在液体培养基并置于适宜的温度中,定时取样检查活菌数,可发现其生长过程具有规律性,主要分4个时期,即迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期。 迟缓期:是细菌来到新环境的一个适应过程,一般约需1-4小时。 对数期:细菌此时生长迅速,以几何级数增长。 稳定期:因营养消耗、代谢产物的蓄积等,新繁殖的活菌数与死亡菌数大致平衡。 衰亡期:细菌开始大量死亡,死菌数超过活菌数。292.3细菌的人工培养 用人工的方法,提供细菌在动物体内生长繁殖需要的基本条件,达到培养细菌、进行鉴定及进一步利用的目的。 人工培养细菌,除需提供充足的营养物质外,还需有合适的酸碱度、适宜的温度及必要的气体环境。(1)培养基 是人工配制的基质,含有细菌生长繁殖必须的营养物质。 按营养组分的差异可分为基础培养基和营养培养基。 按状态差异可分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。 按功能差异可分为鉴别培养基、选择培养基及厌氧培养基。(2)氧气 根据细菌对氧气的需求,可分为需氧菌、厌氧菌和兼性厌氧菌。 根据培养对象的不同,需要提供不同的氧环境。 目前食品卫生微生物检验常见的致病菌多数为需氧菌。(3)温度 不同细菌对温度有不同适应范围,各种细菌又有各自的可生长温度和最适温度。根据细菌对温度的适应范围,可将细菌分为三类:嗜冷菌,生长温度在-5-30℃,最适温度10-20℃;嗜温菌,生长温度10-45℃,最适温度20