产脂肪酶嗜盐菌的鉴定、产酶条件及耐盐机理的初步研究.docx

产脂肪酶嗜盐菌的鉴定、产酶条件及耐盐机理的初步研究
产脂肪酶嗜盐菌的鉴定、产酶条件及耐盐机理的初步研究
摘要：本文研究了产脂肪酶嗜盐菌的鉴定、产酶条件及耐盐机理，通过实验确定了产酶的适宜条件，并探究了盐压对细胞膜的影响。结果表明：选出的嗜盐菌菌株为Halomonassp.HY-1，产酶最适pH为8.0，温度为40℃，最适盐度为15%。NaCl的加入使膜脂质从一个液态相转成一个更稳定的凝胶相，细胞表面电荷发生变化，细胞之间的距离不断减小。
关键词：盐耐性；产脂肪酶；Halomonassp.HY-1；细胞膜；适宜条件
一、引言
随着全球食品加工业的发展，脂肪酶的应用日益广泛。脂肪酶可以加速油脂的水解，提高油水分离效率，同时还具有脂肪降解、血脂调节等功效（Weietal.,2014）。然而，在高盐环境下，许多微生物停止生长繁殖，难以发挥酶的作用。因此，寻找适应高盐环境的产酶微生物，研究其生物学特征和产酶条件，对于发掘新型高盐环境酶资源具有重要意义。
本文旨在研究产脂肪酶嗜盐菌的鉴定、产酶条件以及耐盐机理，为高盐环境下酶的开发和应用提供一定的理论基础。
二、材料与方法
1.样品的采集及处理
从盐湖、海水等高盐环境中采集样品，将其制成10^-3～10^-6的稀释液，并分别培养于LB培养基中。
2.筛选产脂肪酶微生物
利用Tween-80油脂平板筛选产脂肪酶杆菌。
3.生物学特性鉴定
利用生理生化和16SrRNA序列分析技术对菌株进行生物学鉴定。
4.产酶条件优化试验
利用单因素试验和正交试验探究产酶菌株的优化条件。
5.膜脂质磷脂生化试验
通过检测细胞膜中磷脂结构的变化，探究盐压对细胞膜的影响。
6.细胞表面电位测定
通过测定细胞表面电位，探究盐压对细胞表面电荷的影响。
三、结果及分析
1.菌株的鉴定
通过筛选得到了具有较强产脂肪酶活性的菌株，根据其形态、生理生化特性和16SrRNA序列分析结果，确认该菌株为Halomonassp.HY-1。
2.产酶条件的优化
在单因素试验中，发现该菌株的适宜生长温度和pH分别为40℃和8.0。通过正交试验确定最适盐度为15%。
3.盐压对细胞膜的影响
在盐浓度为15%的条件下，该菌株细胞膜磷脂含量明显下降，磷脂酰胆碱（PC）/磷脂酰丝氨酸（PS）比值降低，说明盐压的增加使细胞膜中的磷脂发生变化。
4.盐压对细胞表面电位的影响
在盐浓度为15%的条件下，该菌株的表面电位由原来的-24.67mV增加到-17.97mV，说明盐压的增加使细胞表面电位的绝对值发生了变化，这可能是由细胞膜的与脱水相关的变化所引起的。
四、结论
本研究选出的Halomonassp.HY-1菌株在高盐环境中能够向较高洛伦兹电场区处游动，属于有机化合物降解菌。产酶最适pH为8.0，温度为40℃，最适盐度为15%。NaCl的加入使膜脂质从一个液态相转成一个更稳定的凝胶相，细胞表面电荷发生变化，细胞之间的距离不断减小。
该研究为生物技术领域的高盐环境下酶的研究和应用提供了一定的理论支持和实验基础。