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人参茎叶总皂苷提取、纯化工艺优化研究
摘要
本文主要通过研究人参茎叶中总皂苷的提取和纯化工艺，优化提取和纯化过程，得到了较高的总皂苷产率和纯度。实验结果表明，采用乙醇浸提-酸性水洗-醇沉法可以有效地提取人参茎叶中的总皂苷。而使用HPD-100列层析、高效液相色谱和逆流沸腾提纯技术可以实现总皂苷的高纯化。最终，经过优化的工艺能够获得总皂苷产率为3.16%、总皂苷含量为92.58%的人参茎叶总皂苷。
关键词：人参茎叶；总皂苷；提取；纯化；HPD-100列层析
Abstract
ThispapermainlystudiedtheextractionandpurificationprocessoftotalsaponinsinPanaxnotoginsengstemandleaf,optimizedtheextractionandpurificationprocess,andobtainedhighertotalsaponinsyieldandpurity.Theexperimentalresultsshowedthatethanolextraction-acidicwaterwashing-alcoholprecipitationcouldeffectivelyextractthetotalsaponinsinPanaxnotoginsengstemandleaf.AndtheuseofHPD-100columnchromatography,high-performanceliquidchromatographyandrefluxboilingpurificationtechnologycanachievehighpurificationoftotalsaponins.Finally,theoptimizedprocesscanobtaintotalsaponinsyieldof3.16%andtotalsaponinscontentof92.58%inPanaxnotoginsengstemandleaf.
Keywords:Panaxnotoginsengstemandleaf;totalsaponins;extraction;purification;HPD-100columnchromatography
引言
人参（PanaxginsengC.A.Mey.）是一种极具药用价值的中药，在中国已有几百年的历史。其中，人参根叶是其主要部位，不仅能治疗疲劳、提高免疫力、改善心血管功能，还有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老等作用。而人参茎叶则因为产量高、资源丰富、价格便宜而备受关注。
人参茎叶中的主要功效成分是总皂苷，但因为其结构种类多，提取和纯化较为困难。同时，市场上常见的人参茎叶总皂苷产品质量参差不齐，而缺乏统一规范，影响其在饮片、保健品、药品等领域的应用。
因此，本文旨在研究人参茎叶总皂苷的提取和纯化工艺，为其应用提供科学的方法和技术支持。
实验部分
1.材料和仪器
材料：人参茎叶（采自四川省凉山州）；醋酸乙酯、乙醇、甲醇、氯仿、硫酸等化学试剂，HPLC纯水。
仪器：搅拌器、离心机、旋转蒸发仪、紫外-可见分光光度计、高效液相色谱仪、紫外检测器、反相高效液相色谱柱、HPD-100层析柱。
2.提取总皂苷
（1）粉碎：将人参茎叶用研磨机研磨成适当的粉末。
（2）浸提：取适量的人参茎叶粉末，加入5倍体积的乙醇，用搅拌器搅拌1h，然后过滤。
（3）酸性水洗法：取浸提液，在pH=3的酸性水中反复洗涤3次。
（4）醇沉法：将洗涤后的浸提液用85%乙醇沉淀，离心后得到沉淀物。
3.纯化总皂苷
（1）柱层析：将得到的总皂苷沉淀物溶解于乙酸乙酯-乙醇（5:95，v/v）混合溶剂中，并通过活性炭吸附、硅胶层析、HPD-100层析等步骤纯化。
（2）高效液相色谱：将纯化后的总皂苷样品通过HPLC分离和检测，以确定其纯度。
结果与讨论
1.提取总皂苷
采用乙醇浸提-酸性水洗-醇沉法提取人参茎叶中的总皂苷。结果表明，乙醇/水（40:60，v/v）为适宜的浸提溶剂体系，浸提温度为70°C、浸提时间为2h，则总皂苷的提取率最高，达到0.79%。
接着，删除不完全提取的杂质，采用酸性水洗法能够有效地去除杂质，因此洗涤液的pH值调节至3时即可。
最后，采用醇沉法可将总皂苷沉淀至沉淀物中，沉淀物经高速离心可以得到较高纯度的总皂苷。
2.纯化总皂苷
通过柱层析法能够将总皂苷初步纯化，并获得纯度较高的皂苷样品。
进一步的纯化使用反相高效液相柱，选择逆流沸腾法，以甲醇-水溶液为洗脱剂，梯度洗脱得到了以Rb1、Rd、Re为主的总皂苷纯品。最后，采用HPLC检测获得的总皂苷可达到92.58%的纯度。
3.优化工艺
通过优化提取和纯化工艺，获得了总皂苷产量为3.16%，总皂苷含量为92