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本发明公开了一种黄芪茎叶总皂苷的提取分离纯化方法,包括以下步骤:将黄芪茎叶粉碎并过60目筛,按料液比1:25(g/mL)加入浓度为60%的乙醇,在57℃超声条件下超声提取61min,用1倍体积的水饱和正丁醇萃取2次,减压浓缩至干,即得黄芪茎叶总皂苷提取物;将总皂苷提取物溶液通过AB?8大孔树脂进行纯化,优化出最佳的静态吸附条件为:吸附时间5h、树脂质量与样品液比例为1:15,此时吸附率为50.9%;最佳的静态解吸条件:85%无水乙醇、解吸时间4h、树脂质量与样品液比为1:20,此时解吸率为56.6%;通过AB?8大孔树脂纯化后的黄芪茎叶皂苷纯度达96%以上,抗氧化活性较纯化前增强了110%~120%;该方法简化了提取纯化步骤,节约生产成本;操作简单、易于重复,适于标准工业化生产。