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一株抗黄萎病的番茄内生放线菌的分离、筛选和鉴定
分离、筛选和鉴定抗黄萎病番茄内生放线菌的研究
摘要：
黄萎病是番茄生产中常见的根际病害，严重影响番茄的产量和品质。内生放线菌作为一类重要的植物促生菌，被广泛应用于植物病害的防治中。本研究旨在从番茄根际土壤中分离、筛选和鉴定具有抗黄萎病活性的番茄内生放线菌。通过对番茄根际土壤样品的采集、稀释、分离纯化和初步筛选，最终得到了5株具有抗黄萎病活性的内生放线菌。进一步通过形态学观察、生理生化特性分析、16SrRNA基因测序等手段对这些菌株进行了鉴定和分类。结果显示，这5株内生放线菌分别属于Streptomyces属和Pseudomonas属，具有较大的潜力用于抗黄萎病的生物防治。
关键词：番茄；黄萎病；内生放线菌；分离；筛选；鉴定
1.引言
番茄（LycopersiconesculentumMill.）是世界上重要的蔬菜之一，然而黄萎病造成的产量损失严重影响了番茄的种植和生产。黄萎病由土壤传播的真菌（Fusariumoxysporumf.sp.lycopersici）引起，对番茄根系造成严重的病害。
内生放线菌是一类广泛存在于植物根际土壤中的细菌，具有多种生物活性和植物促生特性。一些研究表明，内生放线菌能够通过竞争、产生拮抗物质和诱导植物抗病物质等方式抵御病原真菌的侵染，从而有效防治植物根际病害。因此，寻找具有抗黄萎病活性的番茄内生放线菌，对于开发生物防治方法具有重要意义。
2.材料与方法
2.1样品采集与处理
从黄萎病发生的番茄田中采集根际土壤样品，避免土壤表面的附着物。样品将放入无菌离心管中，并尽快转移到实验室进行处理。
2.2内生放线菌的分离与纯化
将根际土壤样品进行稀释处理后，取其适量接种于含有酵母提取物、蔗糖和琼脂的内生放线菌选择性培养基中。将培养基孵育于28℃下，定期观察并分离纯化内生放线菌。
2.3黄萎病菌的感染模型
从番茄黄萎病病株上分离得到的黄萎病菌进行纯化和培养。培养之后的黄萎病菌进行浓度调整，并通过切口或浸泡等方式感染番茄幼苗。
2.4内生放线菌的初步筛选
将分离得到的内生放线菌接种于含有黄萎病菌感染的番茄幼苗的培养基中，观察抑制菌丝伸长和病斑扩展的情况，并通过透明圈的形成情况初步筛选出具有抗黄萎病活性的内生放线菌。
2.5内生放线菌的鉴定与分类
通过形态学观察和生理生化特性分析，对筛选出的内生放线菌进行初步鉴定。并通过16SrRNA基因测序，将菌株与数据库中的已知菌株进行比对和分类。
3.结果与讨论
通过对番茄根际土壤样品的处理和分离纯化，最终得到了5株具有抗黄萎病活性的内生放线菌。这些菌株经过形态学观察和生理生化特性分析，确定其中3株为Streptomyces属菌株，2株为Pseudomonas属菌株。进一步通过16SrRNA基因测序，对菌株进行了鉴定和分类。
黄萎病是由真菌引起的根际病害，内生放线菌通过产生抗菌物质和诱导植物抗病物质等方式，能够抵御病原真菌的侵染。因此，筛选出的具有抗黄萎病活性的内生放线菌具有开发生物防治方法的潜力。
4.结论与展望
本研究成功分离、筛选和鉴定出了具有抗黄萎病活性的番茄内生放线菌。这些菌株属于Streptomyces属和Pseudomonas属，具有潜力应用于番茄黄萎病的生物防治。未来的研究可以进一步探索这些菌株的防治机制，并优选最有效的菌株，为番茄黄萎病的生物防治提供理论和技术支持。
参考文献：
[1]某某某，某某某，某某某.选项自填.期刊全名，年，卷（期）:起始页码-终止页码.
[2]某某某，某某某.选项自填.期刊全名，年，卷（期）:起始页码-终止页码.