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抗稻瘟病水稻内生放线菌的筛选鉴定及生物活性的研究 摘要 稻瘟病是水稻的一种常见病害,严重影响了水稻的产量和质量。本研究通过对水稻内生放线菌的筛选鉴定及生物活性的研究,探究了内生放线菌对抗稻瘟病的潜力。研究结果表明,本实验筛选出8株具有抗稻瘟病活性的内生放线菌,并且通过16SrRNA序列分析和生化鉴定,确定了这8株内生放线菌的种属和鉴定了其特性。在体外抗菌实验中,这8株内生放线菌对稻瘟病菌展现出不同程度的抑制作用,其中有4株菌对稻瘟病菌的抑制率超过了90%。本研究表明,内生放线菌具有潜力成为水稻稻瘟病的防治剂,可望为水稻的发展提供有力支撑。 关键词:稻瘟病;水稻内生放线菌;筛选鉴定;生物活性 Abstract Riceblastdiseaseisacommondiseaseinriceplants,whichseriouslyaffectstheyieldandqualityofrice.Inthisstudy,thepotentialofendophyticactinomycetesincontrollingriceblastdiseasewasexploredthroughscreeningandidentificationofendophyticactinomycetesandinvestigatingtheirbiologicalactivities.Theresultsshowedthat8endophyticactinomyceteswithanti-riceblastdiseaseactivitywerescreenedoutinthisexperiment.Through16SrRNAsequenceanalysisandbiochemicalidentification,thespeciesofthese8endophyticactinomyceteswereconfirmedandtheircharacteristicswereidentified.Ininvitroantibacterialexperiments,these8endophyticactinomycetesshoweddifferentdegreesofinhibitionagainstriceblastdisease,and4ofthemshowedinhibitionratesofmorethan90%againstriceblastdisease.Thisstudyshowsthatendophyticactinomyceteshavethepotentialtobecomeapreventiveandtherapeuticagentforriceblastdisease,providingstrongsupportforthedevelopmentofriceplants. Keywords:riceblastdisease;endophyticactinomycetes;screeningandidentification;biologicalactivity 正文 1.引言 水稻是我国重要的经济作物之一,然而稻瘟病作为其常见病害,在水稻生产中给农业生产带来了巨大的影响。传统的农药防治方法不仅会造成水稻产量降低,而且治理费用较高。因此,寻找具有高效、环境友好的防治方法是水稻病害防治的重要课题之一。 内生放线菌是水稻植株内的一类微生物,其具有一定的生物学特性和抗菌活性,因此被认为是潜在的植物保护菌。内生放线菌通过分泌抗性物质,阻止或抑制病原菌的生长和侵袭,从而起到防治植物病害的作用。近年来,越来越多的研究表明,内生放线菌对水稻稻瘟病具有一定的抑制作用,因此研究其抗菌活性及其作用机制是水稻病害防治研究的重要方向。 本研究旨在从多种内生放线菌中筛选出对稻瘟病具有抑制作用的种类,并探究其抗菌作用及其作用机制,为水稻稻瘟病的防治提供有力的理论和实践支持。 2.材料和方法 2.1材料 本研究所用的水稻品种为早稻品种“泰山1号”。稻瘟病菌(Pyriculariaoryzae)由中国农科院植物保护研究所提供。本研究中所使用的内生放线菌菌株来自我校生物学实验室的库存菌株,菌株的保存条件为4℃,保存于NB培养基上。 2.2方法 2.2.1内生放线菌菌种的分离和筛选 将收集的水稻样品用1%次氯酸消毒后,洗去残留的次氯酸,并在80℃下灭菌。将水稻样品置于塑料袋中加入PBS缓冲液,轻轻摇动10分钟后用PBS涂抹在PCA培养基上。将PCA培养基培养于30℃下,观察样品周围是否生长内生放线菌菌株,并通过16SrRNA测序及生化鉴定等方案对分离出的内生放线菌菌株进行筛选。 2.2.2内生放线菌菌株的分离和鉴定 对筛选出的8株内生放线菌菌株进行16SrRNA序列分析