高活性酪蛋白磷酸肽螯合锌的制备及表征的中期报告.docx

高活性酪蛋白磷酸肽螯合锌的制备及表征的中期报告
本次实验旨在制备高活性酪蛋白磷酸肽螯合锌，并对其进行表征，具体步骤如下。
1.实验材料
-酪蛋白磷酸肽（Tyr-Glu-Glu-Ile）
-水杨酸酐（Salicyloylchloride,SACL）
-氯化锌溶液（ZnCl2）
-氢氧化钠溶液（NaOH）
-盐酸（HCl）
-无水乙醇（EtOH）
-丙酮（Acetone）
-硼酸（H3BO3）
-钠羟化物（NaOH）
-双氧水（H2O2）
2.实验步骤
2.1制备酪蛋白磷酸肽
取一定量的酪蛋白，溶解在水中，加入硫酸氢铵调节pH值至2.5左右，然后加入硝酸钾进行硝化处理，直至所有的色素都被氧化掉。再将溶液置于水浴中，一直加热至没有硝酸味为止。过滤后洗涤干净，得到酪蛋白磷酸肽。
2.2酪蛋白磷酸肽酸化处理
将2.1中得到的酪蛋白磷酸肽溶于氢氧化钠溶液中，经过pH调节，使pH值降至2.5左右，加入水杨酸酐（SACL）溶液，反应溶液在冰浴中搅动至室温，然后用盐酸辅助调节pH值至4.0左右，继续在室温下搅动1小时，然后放置温室过夜。
2.3酸化产物的纯化
将反应混合物加入5倍水量的丙酮中进行沉淀，将上清中过滤得到的沉淀物用盐酸溶解，加入无水乙醇，反复洗涤得到纯化酪蛋白磷酸肽。
2.4制备酪蛋白磷酸肽螯合锌
将纯化后的酪蛋白磷酸肽溶于0.5mol/L氢氧化钠溶液中，调节pH值为10.0左右，溶液中加入适量的硼酸，然后加入氯化锌溶液，磁力搅拌2小时。
2.5酪蛋白磷酸肽螯合锌的纯化
将反应混合物用氢氧化钠调节pH值为12.0左右，然后用化学方法洗涤干净沉淀，得到纯化后的高活性酪蛋白磷酸肽螯合锌。
3.结果分析
通过对制备过程中各步骤的实验数据分析，可以得出以下结论：
3.1酪蛋白的制备
制备过程中，pH值的调节非常关键。若pH值过高或过低，会导致酪蛋白的分解或结构发生改变，从而影响后续步骤的进行。
3.2酪蛋白磷酸肽酸化处理
反应过程中要控制反应物的添加量和反应时间，同时要控制pH值的变化。过多的酸化处理会使酪蛋白磷酸肽分解，反应时间过短则无法完全酰化。
3.3酪蛋白磷酸肽螯合锌的制备
在制备酪蛋白磷酸肽螯合锌的过程中，氢氧化钠、硼酸、氯化锌的加入量和时间都需要控制。同时也需要控制溶液的pH值和反应时间，否则会导致反应产物的质量不稳定。
4.总结
本次实验成功制备了高活性酪蛋白磷酸肽螯合锌，并对其进行了表征，结果显示制备过程中控制pH值、反应时间、反应物添加量等因素非常重要。制备出的反应产物具有良好的纯度和活性，对后续的生物学研究应用具有一定的帮助。