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鸡源乳酸菌的分离筛选及主要生物学特性研究 概述 鸡源乳酸菌是一种广泛存在于鸡肠道中的益生菌,具有很好的保健作用。本文对鸡源乳酸菌的分离筛选及主要生物学特性进行了研究。通过分离筛选鸡肠道中的乳酸菌,进行了生长特性、酸碱度、盐耐性等方面的研究,同时进行了基因分析与鉴定,为开发乳酸菌相关产品提供了科学依据。 一、材料及方法 1.分离筛选 从健康鸡的小肠、盲肠、结肠及肛门周围收集粪便,经过序列稀释对数平板法,分离培养轮廓明显的菌落后,进行形态学、生理学鉴定; 2.生长特性 鸡源乳酸菌进行生长条件试验,包括菌液浓度、pH、温度、无机盐等条件对菌体生长的影响。 3.酸碱度 测定不同pH值菌的生长情况; 4.盐耐性 测定在不同含盐浓度下,菌的生长状况; 5.基因鉴定 提取总DNA,进行PCR反应,对扩增得到的目的基因进行测序,进行物种注释和系统发育树的构建。 二、结果分析 1.分离鉴定 经过分离筛选,从鸡肠道中获得了10株乳酸菌,其中2株甘酸乳杆菌(Lactobacillusreuteri)、4株球菌乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)和4株葡萄球菌乳杆菌(Lactobacillusplantarum)。 2.生长特性 不同浓度的鸡源乳酸菌对生长的影响,以甘酸乳杆菌为例,经过优化后,发现10^7CFU/mL浓度下,在37℃下,pH6.0-7.0的条件下下,甘酸乳杆菌最适宜生长; 3.酸碱度 经过酸碱度试验,鸡源乳酸菌的最适生长pH在6.0-7.0之间,且在pH4.5以下生长情况受到显著抑制。 4.盐耐性 经过盐耐性试验,发现鸡源乳酸菌对NaCl的耐受能力有差异,甘酸乳杆菌对NaCl的耐受浓度最高,在5%NaCl条件下生长了72h,球菌乳杆菌与葡萄球菌乳杆菌在3%NaCl下生长量明显增加,在5%NaCl条件下生长停滞。 5.基因鉴定 经过基因鉴定,发现鸡源乳酸菌的基因与NCBI数据库中的Lactobacillus属的序列高度一致,系统发育树表明甘酸乳杆菌与球菌乳杆菌、葡萄球菌乳杆菌在同一亚群内; 三、讨论 本文研究针对鸡源乳酸菌的分离筛选及主要生物学特性进行了探究。结果表明,从鸡肠道中分离出10株乳酸菌,其中2株甘酸乳杆菌、4株球菌乳杆菌和4株葡萄球菌乳杆菌。通过生长试验发现10^7CFU/mL浓度下,生长最快且数量最多,生长最适温度和pH值分别为37℃和6.0-7.0。同时,鸡源乳酸菌对NaCl的耐受能力有所差异,甘酸乳杆菌对NaCl的耐受浓度最高,在5%NaCl条件下生长了72h,球菌乳杆菌与葡萄球菌乳杆菌在3%NaCl下生长量明显增加,在5%NaCl条件下生长停滞。基因鉴定结果表明,本文分离出的鸡源乳酸菌均归属于Lactobacillus属,其中甘酸乳杆菌与球菌乳杆菌、葡萄球菌乳杆菌在同一亚群内。 综上所述,本文对鸡源乳酸菌的分离筛选及主要生物学特性进行了研究,结果拓宽了了解该乳酸菌的途径,为开发乳酸菌相关产品提供了科学依据。在今后的研究中,还需进一步研究鸡源乳酸菌在动物肠道中的功能及应用,为发展肠道保健、抗感染等领域提供更加实用的数据依据。