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腹腔置管引流对重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞内钙超载的作用
摘要
目的：探讨腹腔置管引流对重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞内钙超载的作用。
方法：选取SD大鼠80只，随机分为3组：正常对照组、重症急性胰腺炎组和置管引流组，每组30只。采用角叉菜提取物注射诱发急性胰腺炎模型，置管引流组在胰腺造模的同时进行腹腔置管引流。静置制备单个腺泡细胞，利用荧光素-促AM染色法测定腺泡细胞内钙水平。
结果：与正常对照组相比，重症急性胰腺炎组腺泡细胞内游离钙浓度显著升高，差异有统计学意义（P<0.05）；置管引流组腺泡细胞内游离钙浓度显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。重症急性胰腺炎组和置管引流组间游离钙浓度差异亦有统计学意义（P<0.05）。
结论：腹腔置管引流可减轻重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞内钙超载，具有一定的治疗作用。
关键词：重症急性胰腺炎；腹腔置管引流；腺泡细胞；钙超载
Introduction
重症急性胰腺炎（severeacutepancreatitis，SAP）是一种常见的急腹症，其发生率逐年上升，是临床常见的危重病之一。SAP患者在临床表现上伴有明显的炎症反应和全身炎症综合征等病情，病情较严重。
以往研究表明，SAP患者出现胰腺钙化、肥实、胰腺坏死等症状，腺泡细胞内钙超载是导致胰腺炎的重要因素之一。同时，研究亦表明，目前临床治疗手段对于治疗SAP仍然存在一定的局限性。因此，探究新的治疗手段具有重要的临床意义。
本次研究旨在探究腹腔置管引流对SAP大鼠腺泡细胞内钙超载的影响，为SAP的临床治疗提供一定的理论参考。
Materialsandmethods
动物选取
选取非近交系SD大鼠80只，体重180g~220g，雌雄不限，按随机数字表法分为3组（n=30），即正常对照组、重症急性胰腺炎组和置管引流组。
制备模型
重症急性胰腺炎模型制备：采用角叉菜提取物注射构建胰腺炎模型。具体方法是将10g角叉菜制成提取物，注射浓度为2mL/kg，速度为0.2mL/min，一次注射剂量为0.2mL（每只大鼠注射一次），模型构建24h后进行下一步实验。
操作步骤
1.置管引流组操作：在制备模型的同时，对置管引流组进行手术操作，将大鼠腹腔置管引流，保留引流系统24h，然后拆除。
2.采集腺泡细胞：采取完整累及酶的胰腺分别逆流注入含有维持液的离体消化及分离液，筛选腺泡细胞并进行培养。
3.对腺泡细胞进行流式细胞荧光染色：采用荧光素-促AM染色法，具体方法是腺泡细胞在37℃、CO25%培养箱内静置10min，在取出后加入荧光素-AM（5μM）处理液，再静置20min。然后，进行过量荧光素-促AM的洗脱并加入Ca2+-仿体和DNase-I。最后，利用荧光细胞分析仪（FACS）检测腺泡细胞内钙离子含量。
统计分析
采用SPSS22.0统计软件，对所有数据进行统计分析，结果以t检验表示。
Results
腺泡细胞内游离钙浓度
结果表明，与正常对照组相比，重症急性胰腺炎组腺泡细胞内游离钙浓度显著升高，差异有统计学意义（P<0.05）；置管引流组腺泡细胞内游离钙浓度显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。重症急性胰腺炎组和置管引流组间游离钙浓度差异亦有统计学意义（P<0.05）。实验数据见图1。
Image
Fig.1.腺泡细胞内游离钙浓度。
Discussion
SAP是一种常见急腹症，当前SAP患者的患病率逐年上升，临床治疗手段亦存在一定的问题。研究表明，钙离子过载是SAP患者出现胰腺坏死等症状的重要原因之一。针对钙离子过载的控制可以作为SAP治疗的一个重要方向，而腹腔置管引流是一种行之有效的治疗手段。
本次研究发现，重症急性胰腺炎组大鼠腺泡细胞内游离钙浓度明显升高，与正常对照组有显著差异，而采取腹腔索引流手段后，大鼠腺泡细胞内游离钙浓度明显降低，与正常对照组有无显著性差异。因此，本实验结果表明，腹腔置管引流可以降低SAP大鼠腺泡细胞内钙超载的情况。
腹腔置管引流的治疗机制可能与多种因素相关，具体包括：有效清除胰液渗漏和胆汁流，防止胆汁或其它含有急性炎性物质的液体渗漏的周围和局部炎症和毒性损害；避免胰腺坏死组织的细菌感染；通过引流炎性渗出物，减轻胰腺和其它周围器官的压力等。
总体来看，腹腔置管引流可能具有一定的治疗效果，但具体的局限性和治疗难度需要进一步探讨。
Conclusion
腹腔置管引流可以有效控制SAP大鼠腺泡细胞内钙超载，并且具有较好的治疗作用。但从治疗的角度而言，如何进一步有效地选取实验对象、如何三临床实践中使该治疗手段应用得更加合理化和精确化等问题都需要进一步研究。
Keywords:重症急性胰腺炎；腹腔置管引流；腺泡细胞；钙超载