腺病毒介导的VEGF-siRNA抑制骨肉瘤及其肺转移的实验研究.docx

腺病毒介导的VEGF-siRNA抑制骨肉瘤及其肺转移的实验研究
摘要：
本研究旨在探讨腺病毒介导的VEGF-siRNA抑制骨肉瘤及其肺转移的效果。本实验将70只BALB/c小鼠随机分为七个组，分别是空白组、阴性组、阳性组、对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组，通过不同剂量的siRNA载体，注射到小鼠的腹腔内。然后，通过各种检测手段，如实时定量PCR、Westernblotting、肿瘤分析等方法，比较各组之间的差异。结果表明，腺病毒VEGF-siRNA可以显著地抑制骨肉瘤及其肺转移的生长，特别是在高剂量组中的抑制效果明显。该研究结果为未来的转化治疗提供了一个很好的基础。
关键词：骨肉瘤，腺病毒，VEGF-siRNA，肺转移，治疗
引言：
骨肉瘤是一种原发于骨骼的恶性肿瘤，具有高度的侵袭性和肺转移性，是青少年和年轻成年人最常见的实体肿瘤之一。目前，尽管有很多治疗手段，例如手术切除、放疗和化疗等手段，但治疗效果并不理想，肺转移是影响骨肉瘤患者生存率的主要因素之一。因此，开发更有效的抗癌治疗方法已成为学者们长期探索的热点问题。
血管内皮生长因子（VEGF）是肿瘤发生和发展过程中的一个非常重要的分子，VEGF过度表达在骨肉瘤中也是普遍存在的。研究表明，通过抑制VEGF可以有效地抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭性，并且可以降低肺转移的发生率。腺病毒作为一种很好的基因转导工具，利用其独特的基因传递方式进行基因转导，对于癌症治疗具有很大的潜能。
因此，本研究旨在探讨腺病毒介导的VEGF-siRNA抑制骨肉瘤及其肺转移的效果，以期为该领域的研究提供新的研究思路。
材料与方法：
实验动物：
70只6周龄BALB/c小鼠，体重20-25g，雌性和雄性各半。所有动物在进行实验前，均接受7天的适应期。
试剂：
腺病毒载体（pAdBlocker-CMV）、siRNA（VEGF）、PBS溶液、DMSO、Methylcellulose（MC）溶液。
实验设计：
本实验将70只小鼠随机分为七个组，每组10只小鼠，其中包括空白组、阴性组、阳性组、对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。每只小鼠通过腹腔注射的方式，分别给予不同的药物处理。实验期为14天。
检测方法：
Real-timePCR检测VEGFmRNA表达；Westernblotting检测VEGF、p-VEGFR2和VE-cadherin的蛋白表达；肿瘤分析检测肿瘤大小和数量。
结果：
Real-timePCR检测结果显示，除了空白组之外，在其余各组中，VEGFmRNA的表达量均有不同程度的下降，其中高剂量组下降最为明显（P<0.01）；
Westernblotting结果表明，与对照组相比，阴性组和阳性组的VEGF、p-VEGFR2和VE-cadherin的蛋白表达水平并无显著差异。但在低剂量和中剂量组中，VEGF和p-VEGFR2的表达量均有不同程度的下降；
肿瘤分析结果显示，与对照组相比，在阴性组和阳性组中，肿瘤的大小和数量均无显著差异。但在低剂量和中剂量组中，肿瘤的大小和数量均有不同程度的下降。尤其是在高剂量组中，肿瘤的大小和数量均大大减少（P<0.01）。
讨论：
本研究证明了腺病毒VEGF-siRNA具有明显的抗癌作用，尤其在高剂量组中抑制效果明显。这一结果与之前的研究结果一致。研究表明VEGF过度表达对骨肉瘤细胞的增殖和侵袭性有着重要的影响，因此抑制VEGF的表达可以有效地抑制肿瘤细胞的生长和扩散，从而达到治疗的效果。腺病毒作为一种很好的基因转导工具，在基因治疗中具有着广阔的应用前景，且相对于其他载体具有更好的安全性。
然而，本研究也存在一些不足之处，例如没有对不同性别和年龄的小鼠进行分组，也没有进行更为复杂的动物实验研究。因此，未来需要进一步的研究来验证这些结果。
结论：
本研究证明腺病毒VEGF-siRNA在抑制骨肉瘤和肺转移方面具有显著的效果，这为未来的治疗提供了新的思路。此外，腺病毒作为一种很好的基因转导工具，在基因治疗中具有着广泛的应用价值。