腺病毒介导的VEGF-siRNA抑制骨肉瘤及其肺转移的实验研究的任务书.docx

腺病毒介导的VEGF-siRNA抑制骨肉瘤及其肺转移的实验研究的任务书
任务书
任务名称：腺病毒介导的VEGF-siRNA抑制骨肉瘤及其肺转移的实验研究
任务介绍：
骨肉瘤是一种高度恶性肿瘤，由于它具有较高的转移和复发率，使得它的治愈率大大降低。因此，对于骨肉瘤的治疗，仍然存在一定的难度。而血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）在骨肉瘤的生长、转移和侵袭过程中起到了非常重要的作用。因此，抑制VEGF的表达可能成为治疗骨肉瘤的一种新方法。本实验旨在通过使用腺病毒介导的siRNA技术，来抑制骨肉瘤中的VEGF表达。同时，本实验还将研究VEGF-siRNA对骨肉瘤肺转移的抑制作用，为骨肉瘤的治疗提供新思路。
任务目标：
1、通过设计和构建载有VEGF-siRNA的腺病毒载体，成功转染骨肉瘤细胞，并检测VEGF-siRNA的表达情况。
2、通过细胞增殖试验、凋亡试验和小鼠动物模型，研究VEGF-siRNA对骨肉瘤的抑制作用。
3、通过小鼠肺转移模型，研究VEGF-siRNA对骨肉瘤肺转移的抑制作用。
4、分析VEGF-siRNA对小鼠的安全性和毒副作用情况，为进一步临床应用提供数据支持。
任务步骤：
1、设计并构建载有VEGF-siRNA的腺病毒载体。
a.从NCBI数据库中获取VEGF序列信息，并设计VEGF-siRNA序列。
b.将VEGF-siRNA序列与腺病毒质粒进行重组，构建出VEGF-siRNA腺病毒载体。
2、转染骨肉瘤细胞，并检测VEGF-siRNA的表达情况。
a.将VEGF-siRNA载体转染入骨肉瘤细胞中。
b.通过实时荧光定量PCR和Westernblotting检测VEGF-siRNA的表达情况。
3、研究VEGF-siRNA对骨肉瘤细胞的抑制作用。
a.使用MTT法和凋亡检测法，检测VEGF-siRNA对骨肉瘤细胞的抑制作用。
b.通过小鼠动物模型，研究VEGF-siRNA对骨肉瘤生长的抑制作用。
4、研究VEGF-siRNA对骨肉瘤肺转移的抑制作用。
a.建立小鼠骨肉瘤肺转移模型，并注射VEGF-siRNA载体。
b.通过肺组织切片和免疫组织化学染色等方法，检测VEGF-siRNA对骨肉瘤肺转移的抑制作用。
5、分析VEGF-siRNA对小鼠的安全性和毒副作用情况。
a.通过注射VEGF-siRNA后，观察小鼠的行为和生长情况。
b.通过观察小鼠主要脏器和组织的形态学改变，分析注射VEGF-siRNA可能产生的毒副作用。
任务成果：
1、设计和构建载有VEGF-siRNA的腺病毒载体。
2、VEGF-siRNA的表达情况检测结果。
3、研究VEGF-siRNA对骨肉瘤细胞和肺转移的抑制作用实验数据。
4、VEGF-siRNA对小鼠的安全性和毒副作用实验数据。
5、实验结果的分析和讨论。
6、任务报告。
时间安排：
任务启动时间：2020年1月1日
任务完成时间：2020年6月30日