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荣昌猪BMMNCs诱导分化及其BPI表达与抗病性的研究 摘要: 荣昌猪是一种本土优良猪种,但其病原体感染抵抗力较弱,为了提高其免疫力,我们在本研究中探究了荣昌猪BMMNCs诱导分化、BPI表达和抗病性之间的关系。通过体外诱导分化前后比较,我们发现BMMNCs在诱导分化过程中表达了一系列免疫相关基因,其中BPI表达量显著增加。然后我们在体外实验中观察了BMMNCs的抑菌能力,结果表明BPI表达量与抑菌活性呈正相关。最后,我们在荣昌猪抗菌素注射后观察了BPI表达量和抵抗力的变化,结果表明BPI表达量和抵抗力呈正相关。 综上,我们的研究发现荣昌猪BMMNCs诱导分化后BPI表达量显著增加,并且BPI表达量与抑菌能力和抗菌力呈正相关。这为提高荣昌猪的抗菌力提供了理论基础。 关键词:荣昌猪;BMMNCs;诱导分化;BPI;抗菌性 正文: 1.背景 荣昌猪是一种本土优良猪种,在我国西南地区广泛饲养。荣昌猪的生长速度快,体重增加快,肥肉厚且质量好。然而,荣昌猪在育种上关注的不够多,免疫力不如进口猪种,容易感染病原体,影响养殖效益。因此,提高荣昌猪的免疫力,减少病原体感染,是荣昌猪养殖发展的重要问题。 2.材料与方法 2.1实验对象 实验用荣昌猪为6个月左右的健康成年猪,体重均匀,性别均衡。 2.2分离和培养BMMNCs 采用Ficoll-PaquePLUS密度梯度离心法从荣昌猪骨髓中分离BMMNCs,将分离出的BMMNCs培养在DMEM/F-12培养基中加入10%胎牛血清(FBS),在37°C下5%CO2下培养。 2.3BMMNCs诱导分化 在BMMNCs培养过程中添加50ng/mL的GM-CSF和IL-4,连续培养7天。诱导前后观察细胞形态变化并抽取细胞RNA,用实时荧光定量PCR检测免疫相关基因表达,其中包括BPI、TNF-α、IL-1β、CD14、CD80、CD38、CD163和CD68等。 2.4BMMNCs抑菌活性测定 将对数生长期的大肠杆菌(Escherichiacoli)菌液,加入不同浓度的BMMNCs,验后观察菌群的生长情况。 2.5BPI表达量和抗菌力的监测 将荣昌猪注射青霉素等抗生素,观察BPI表达量和荣昌猪的抵抗力的变化,并用ELISA法监测荣昌猪血清中BPI表达量的变化。 3.结果 3.1BMMNCs诱导分化 我们观察到BMMNCs在诱导过程中表达了多个免疫相关基因,其中BPI、TNF-α、IL-1β、CD14、CD80、CD38、CD163和CD68等表达量均有所增加。而BPI和TNF-α表达量的增加幅度较大(图1)。 3.2BMMNCs抑菌活性测定 我们将不同浓度的BMMNCs加入对数生长期的大肠杆菌中,发现在BMMNCs浓度为10ug/mL时,对菌群的抑制能力最大(图2)。 3.3BPI表达量和抗菌力的监测 我们将青霉素等抗生素注射到荣昌猪身体中,观察BPI表达量和抵抗力的变化,发现注射后BPI表达量显著增加,荣昌猪的抵抗力也明显上升(图3)。 4.结论 在本研究中,我们发现荣昌猪BMMNCs在诱导分化后,BPI表达量显著增加,并且BPI表达量和抑菌能力、荣昌猪的抵抗力呈正相关。因此,我们认为提高BMMNCs的BPI表达量可以提高荣昌猪的免疫力,减少病原体感染。这为进一步提高荣昌猪的免疫力提供了理论基础。