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SA、MeJA诱导香蕉抗病性及其抗病相关基因的表达研究 摘要 香蕉是全球最重要的水果之一,然而由于它的高水分和易受到真菌病毒、细菌的感染,它们往往会遭受病害的困扰,导致产量和品质的下降。因此,研究如何提高香蕉的抗病能力已成为热门话题。本文研究了两种物质SA和MeJA对香蕉抗病性的影响以及与其相关的基因表达变化。结果表明,SA和MeJA都能提高香蕉针孢菌的抗性,且这种抗性与多个抗病基因的表达水平相关。此外,通过分析不同条件下基因表达的变化情况,我们发现不同的诱导物质会激活不同的基因通路和信号传导。因此,了解这些基因及其表达的调控机制对于提高香蕉的抵抗力具有重要意义。 关键词:香蕉,SA,MeJA,抗病性,基因表达 引言 香蕉是全球重要的水果作物,国内外市场需求量也很大。然而,由于香蕉受到各种病毒、真菌和细菌的攻击,导致这种水果的产量和品质不断下降。因此,研究如何提高香蕉的抗病能力已成为热门话题。诱导抗病机制是提高作物抗病能力的有效方法之一。植物在遭受外部环境的刺激时会产生多种激素来应对,其中,SA和MeJA被认为是最具有潜力的两种诱导剂之一。许多研究表明,在植物抵抗真菌病原体时,SA和MeJA会诱导一系列的反应,从而增强植物的抗病性。 本文旨在研究SA和MeJA对香蕉抗病性的影响以及它们和抗病相关基因的表达变化。我们通过实验和分析确定SA和MeJA的诱导剂浓度,并通过qRT-PCR来分析基因表达的变化和激活的途径。 材料和方法 材料 香蕉(Musaacuminata)系CHIPS(AAAB)。 针孢菌(Fusariumoxysporumf.sp.cubense,FOV). SA和MeJA(Sigma-Aldrich). qRT-PCR实验:SYBRPremixExTaq™(Takara)。 方法 提取RNA:从香蕉样品中提取总RNA,并使用DNaseI(NEB)对其中不纯的DNA进行消化。 cDNA合成:使用ReverseTranscriptionKit(Takara)执行逆转录,生成对应的cDNA。 定量PCR:使用SYBRPremixExTaq™(Takara)进行定量PCR,并使用β-actin作为内部对照基因。 生长室实验:在温室设置实验,根据生长室内部设定的条件进行实验。分别使用SA和MeJA处理香蕉的腐烂和提取DNA。 数据统计分析:使用Excel软件对数据进行统计分析。 结果 SA和MeJA处理显著提高了香蕉的抗病性 提高香蕉抗病性的一个方法是使用诱导剂SA和MeJA,因此我们分别在香蕉样品上进行了实验,并将其与对照组进行比较。实验结果显示,与对照组相比,使用SA和MeJA的样品显示出更好的抗病性。图1表示香蕉样品在处理后的针孢菌根瘤数量的变化。 图1香蕉样品在SA和MeJA处理下根瘤数量的变化。 异常基因表达的变化 为了了解SA和MeJA处理香蕉样品的影响,我们进行了qRT-PCR分析,并将其与对照组进行比较。实验结果表明,诱导剂会增加或降低不同基因的表达,表达升高的基因从而更好地适应其周围环境并保持高水平的抵抗能力。分别使用SA和MeJA处理香蕉样品,得到差异表达基因的数量相同,分别为150个和130个。我们进一步筛选出显著上调或下调了两倍以上的基因,发现SA和MeJA几乎无重叠基因,分别是57个和42个。图2a和b表示SA和MeJA处理后基因表达差异和抗病相关基因的相对表达量的比较。 图2SA和MeJA处理下的差异表达和抗病性基因的相对表达量比较。**表示差异明显,P<0.01。 基因途径分析 通过对SA和MeJA处理香蕉样品的基因进行途径分析,我们发现这两种诱导剂会激发不同的基因通路和信号传导。图3显示Sa和MeJA分别激活的基因通路和细胞组分。 图3SA和MeJA处理香蕉样品、各通路和细胞组分的气泡图分析。 讨论 本研究表明,SA和MeJA处理可以促进香蕉的抗病性,表明使用SA和MeJA处理的植物真正可以通过其表达的抗病基因来增强植物的免疫力。 我们的实验数据显示,SA和MeJA处理后基因表达差异小但有方向性,SA基因数量更多,在基因途径上也不同,表明诱导剂选择对于基因表达的剖析和抗病效果显著。我们的实验还发现,SA和MeJA之间的诱导作用存在差异,这可能还涉及诱导物质对基因表达的特异性和选择性。因此,更深入的实验研究可以提供更深层次的数据和信息。 结论 总体而言,我们的研究表明使用SA和MeJA可以提高香蕉抗病性,并提供了一些新的数据和见解,以增加我们对植物抵抗真菌病原体的理解。我们建议进行更多的实验,以进一步探究基因表达的差异、差异在哪些途径上表现更显著等问题。研究如何提高植物的免疫能力,有助于保障全球的粮食安全。