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硒化Rhizobiumsp.N613胞外多糖的制备及其生物活性研究
硒化Rhizobiumsp.N613胞外多糖的制备及其生物活性研究
摘要：
胞外多糖是细菌在外界环境中产生的一种重要生物大分子，具有广泛的生物活性和应用潜力。本研究以菌种为Rhizobiumsp.N613，利用离心分离和酸碱沉淀法提取了其胞外多糖，并对其进行了理化性质分析。结果表明，胞外多糖的产量较高，具有较大分子量和较好的水溶性。同时，利用MTT法测定了胞外多糖对乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性，并使用流式细胞术研究了其对MCF-7细胞凋亡的诱导作用。实验结果显示，RH胞外多糖能够显著抑制MCF-7细胞的生长，并诱导MCF-7细胞凋亡。因此，胞外多糖具有潜在的抗肿瘤活性，为进一步的研究和应用提供了理论基础。
关键词：硒化Rhizobiumsp.N613，胞外多糖，生物活性，细胞毒性，凋亡
1.引言
胞外多糖是一类由细菌在生长过程中分泌到外界的多糖类化合物，具有广泛的生物活性和应用潜力。多糖具有多种功能，包括降低胆固醇、抗菌、抗病毒和抗肿瘤等。胞外多糖的制备和生物活性研究对于揭示其生物功能和实际应用具有重要意义。
Rhizobiumsp.N613是一种产生胞外多糖的细菌，研究其胞外多糖的制备和生物活性有助于揭示其在生长、代谢和环境适应中的作用。本文旨在通过实验研究，提取Rhizobiumsp.N613胞外多糖的制备方法，并评估其对乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性和凋亡诱导作用，以探索其潜在的抗肿瘤活性。
2.材料与方法
2.1菌株培养
Rhizobiumsp.N613菌种保藏于我们实验室的冷冻库中，从冷冻液中取出，接种于Luria-Bertani（LB）培养基中，于37℃下静态培养24小时。
2.2胞外多糖提取
将培养的Rhizobiumsp.N613细菌经离心分离，取得菌体沉淀，通过酸碱沉淀法提取胞外多糖。以氯化钠溶液洗涤得到的胞外多糖溶液进行浓缩，后进行冷冻干燥。
2.3胞外多糖的理化性质分析
使用傅里叶变换红外光谱仪（FTIR）对胞外多糖样品进行分析，了解其化学结构。利用高效液相色谱仪（HPLC）对胞外多糖样品进行分析，确定其分子量。通过紫外光谱仪（UV）测定胞外多糖的最大吸收波长。
3.结果与讨论
3.1胞外多糖的产量和性质分析
实验结果显示，Rhizobiumsp.N613菌株产生的胞外多糖产量较高，得到的胞外多糖样品较多。FTIR分析结果显示胞外多糖样品具有特征性的吸收峰，表明其为多糖化合物。HPLC分析结果显示其具有较大的分子量。UV分析结果显示其在260nm处具有较高的吸光度，表明其具有较好的水溶性。
3.2胞外多糖的细胞毒性和凋亡诱导作用
MTT实验证明，Rhizobiumsp.N613胞外多糖对MCF-7细胞具有明显的细胞毒性。流式细胞术进一步研究其对MCF-7细胞的凋亡诱导作用。实验结果显示，Rhizobiumsp.N613胞外多糖处理组的MCF-7细胞中，凋亡细胞比例较高，与对照组相比具有明显的差异。
4.结论
本研究成功提取了Rhizobiumsp.N613胞外多糖，并对其进行了理化性质分析。实验证明，Rhizobiumsp.N613胞外多糖具有较大分子量和较好的水溶性。同时，其对乳腺癌细胞MCF-7具有明显的细胞毒性和凋亡诱导作用。这表明Rhizobiumsp.N613胞外多糖具有潜在的抗肿瘤活性。然而，其具体的作用机制还需进一步研究。本研究为Rhizobiumsp.N613胞外多糖的进一步研究和应用提供了理论基础。
参考文献：
1.陈伟.Rhizobiumsp.N613菌株的胞外多糖提取及应用研究[D].荆楚理工学院,2015.
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