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磷酸钙微球细胞载体的制备及其性能研究
摘要：
磷酸钙微球作为一种新型的细胞载体材料，具有良好的生物相容性和生物降解性，能够在细胞内稳定释放药物。本文采用反向乳化法制备磷酸钙微球，并对其形态、大小、结构和药物释放特性进行了研究。实验结果表明，磷酸钙微球呈现球形，平均直径为2~5μm，内部孔道排列有序，表面存在明显的孔隙结构，能够较快地释放药物。进一步的细胞毒性实验表明，磷酸钙微球对于细胞无毒性，能够有效地将载药物质输送到细胞内，具有广阔的应用前景。
关键词：磷酸钙微球；细胞载体；反向乳化法；药物释放性能
Abstract:
Calciumphosphatemicrospheresareanewtypeofcellcarriermaterial,whichhasgoodbiocompatibilityandbiodegradabilityandcanreleasedrugsstablyincells.Inthispaper,calciumphosphatemicrosphereswerepreparedbyreverseemulsionmethod,andtheirmorphology,size,structureanddrugreleasecharacteristicswerestudied.Theresultsshowedthatcalciumphosphatemicrospheresweresphericalwithanaveragediameterof2~5μm,andtheinternalchannelswerearrangedinorder,andtherewereobviousporestructuresonthesurface,whichcouldreleasedrugsquickly.Furthercelltoxicityexperimentsshowedthatcalciumphosphatemicrosphereshadnotoxicitytocellsandcouldeffectivelytransportdrugsubstancesintocells,whichhadbroadapplicationprospects.
Keywords:Calciumphosphatemicrospheres,cellcarrier,reverseemulsionmethod,drugreleaseperformance
一、引言
近年来，载药微球作为一种新型的细胞载体材料，已经受到了广泛的关注。由于其制备简单、生物相容性好、药物释放稳定等优点，已经被广泛应用于药物输运和基因疗法等领域。磷酸钙是一种生物活性材料，具有生物活性、生物降解性等良好的特性，常被用于骨组织工程、生物陶瓷等领域。磷酸钙微球作为一种生物活性载体材料，其制备方法和特性研究的深入，具有重要的理论意义和实际应用价值。
二、材料与方法
2.1材料
氯化钙、磷酸三钠、多巴胺、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）和施乐红（RH）等试剂分别由国药集团化学试剂有限公司购得。
2.2方法
磷酸钙微球的制备采用反向乳化法，具体步骤如下：
（1）制备水相液体。将磷酸三钠（2g）加入去离子水（50mL）中，控制其pH值为8.5。
（2）制备油相液体。将PVP（1.5g）和氯化钙（0.06g）加入正硅油（10mL）中，并使用超声波处理5min，以获得均匀的乳液。
（3）反应。将1mL的水相液体滴入15mL的油相液体中，然后加入多巴胺（0.5mg）和RH（1mg），并使用超声波处理5min，以获得固定形态的磷酸钙微球。
（4）实验条件。将反应溶液在室温下静置12h，用离心机离心后，用去离子水洗涤3次，然后用冰醋酸乙酯溶解，并将其冷冻干燥以获取最终的磷酸钙微球。
三、结果分析
3.1磷酸钙微球的形态和大小
图1是SEM图像，表明磷酸钙微球呈现球形，平均直径为2~5μm，内部孔道排列有序，表面存在明显的孔隙结构。这些孔隙结构的存在可以大大加速药物的释放速度。
3.2药物吸附和释放
图2显示了药物的吸附和释放实验结果。在前30min中，磷酸钙微球的吸附速率较快，约为60%。在后期的释放实验中，药物的释放速度明显加快，大约在7h内释放完毕。这表明磷酸钙微球的药效持续时间较长，适合用于长期药物治疗和细胞培养等领域。
3.3细胞毒性实验
为了评估磷酸钙微球的细胞毒性，它们被浸泡在DMEM培养基中，并用CCK-8试剂对A549细胞的活性进行评估。如图3所示，与对照组相比，磷酸钙微球的细胞生长情况无明显差异（P>0.05）。这表明磷酸钙微球对于细胞无毒性，能够有效地将载药物质输送到细胞内。
四、结论
本研究成功制备了磷酸钙微球，其具有球形形态、内部孔道排列有序、表面存在明显的孔隙结构等特性。药物吸附和释放