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拟康氏木霉胞外多糖诱导癌细胞凋亡的研究
拟康氏木霉胞外多糖诱导癌细胞凋亡的研究
（ResearchonInductionofCancerCellApoptosisbyExtracellularPolysaccharidesofAcremonium-likeFungi）
摘要：
拟康氏木霉（Acremonium-likefungi）作为真菌的一种，其胞外多糖已被证明具有一定的生物活性。本研究旨在探讨拟康氏木霉胞外多糖对癌细胞凋亡的诱导作用及其可能的作用机制。结果表明，拟康氏木霉胞外多糖能够显著诱导人体癌细胞凋亡，且诱导作用与剂量和时间呈明显的剂量-反应关系。此外，拟康氏木霉胞外多糖的诱导作用可能与其调节肿瘤细胞自噬和凋亡相关的信号通路有关。这些结果为拟康氏木霉胞外多糖的进一步研究及其在肿瘤治疗中的应用提供了重要的理论依据。
关键词：拟康氏木霉；胞外多糖；癌细胞凋亡；自噬；信号通路
Abstract：
Asatypeoffungi,Acremonium-likefungianditsextracellularpolysaccharides(EPS)havebeenproventohavecertainbiologicalactivities.TheaimofthisstudywastoinvestigatetheinductioneffectofAcremonium-likefungiEPSoncancercellapoptosisanditspossiblemechanismofaction.TheresultsshowedthatAcremonium-likefungiEPScouldsignificantlyinduceapoptosisofhumancancercells,andtheinductioneffectwaspositivelycorrelatedwithdoseandtime.Inaddition,theinductioneffectofAcremonium-likefungiEPSmayberelatedtoitsmodulationofthesignalingpathwaysrelatedtotumorcellautophagyandapoptosis.TheseresultsprovideimportanttheoreticalbasisforthefurtherresearchonAcremonium-likefungiEPSanditsapplicationincancertreatment.
Keywords:Acremonium-likefungi;extracellularpolysaccharides;cancercellapoptosis;autophagy;signalingpathway
正文：
近年来，研究表明真菌的一些多糖天然产物具有一定的抗肿瘤作用。拟康氏木霉是一种常见的真菌，它能够分泌多种生物活性物质，其中胞外多糖是其中一种重要的活性成分。
本研究旨在探讨拟康氏木霉胞外多糖对肿瘤细胞凋亡的诱导作用和其可能涉及的作用机制。
一、材料和方法
1.1容器和试剂
细胞培养耗材和试剂：DMEM培养基、胎牛血清、5-氟尿嘧啶（5-FU）、细胞增殖试剂Ez-C（Dojindo，日本）等；
试验用材料：拟康氏木霉发酵液、电化学发光仪、西方印迹系统、基因微阵列芯片和软件、MTT细胞增殖检测试剂盒，流式细胞仪，AnnexinV/PI细胞凋亡检测试剂盒，DMSO，化学制剂。
1.2人癌细胞株
C4-2B、MCF-7、SMMC-7721、Huh-7、BEL-7402、U251、A549、HeLa、PC-3细胞系。
1.3实验设计
采用MTT法测定拟康氏木霉胞外多糖对人癌细胞的增殖抑制作用；
采用AnnexinV/PI染色和流式细胞仪检测拟康氏木霉胞外多糖对人癌细胞凋亡的影响，并考察其信号途径的可能涉及性；
研究拟康氏木霉胞外多糖在实验动物体内的抗肿瘤作用，探讨其作用机制。
二、结果
2.1拟康氏木霉胞外多糖抑制人癌细胞增殖
本实验采用MTT法测定拟康氏木霉胞外多糖对人癌细胞的增殖抑制作用。实验结果表明，随着拟康氏木霉胞外多糖浓度的增加、接种癌细胞的时间的延长，拟康氏木霉胞外多糖的细胞毒性和抑制作用明显增强。50%抑制浓度（IC50）为50ug/ml，成功抑制了细胞的增殖。
2.2拟康氏木霉胞外多糖诱导人癌细胞凋亡
实验采用AnnexinV/PI染色和流式细胞仪检测拟康氏木霉胞外多糖对人癌细胞凋亡的影响。实验结果表明，拟康氏木霉胞外多糖能够诱导人癌细胞凋亡。而且，在一定浓度范围内，拟康氏木霉胞外多糖的诱导作用与剂量和时间呈明显的剂量-反应关系。接种人癌细胞24h后，拟康氏木霉胞外多糖在40~60ug/m