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串联的纳米传感器用于癌细胞中miRNA的荧光定量检测的任务书 任务背景: miRNA是一类非编码RNA小分子,它们具有参与基因表达调控、细胞生长、信号转导和肿瘤发生等生物学重要功能。miRNA在肿瘤细胞中的异常表达被广泛研究,并被证实是肿瘤发生的重要因素之一。目前,miRNA检测已成为肿瘤研究和诊断的重要手段之一。传统的miRNA检测方法多数采用的是定量PCR、Northernblot和westernblot等方法,但是这些方法存在耗时长、操作复杂、样品稀少等缺点,阻碍了miRNA的快速检测和实时监测。因此,开发一种灵敏度高、快速实用的miRNA检测方法具有重要意义。 纳米传感器是一类可见和荧光探针,可用于检测生物分子,如蛋白质、核酸和小分子化合物。与传统的检测方法相比,纳米传感器具有灵敏度高、选择性好、检测速度快等优点,对miRNA检测具有很大的应用前景。 任务要求: 本任务要求利用纳米传感器的特点设计和构建一个纳米传感器用于癌细胞中miRNA的荧光定量检测。具体任务包括以下三个方面: 1.设计和构建纳米传感器 利用合成生物学方法设计和构建一种纳米传感器。将构建好的传感器引入到细胞中,检测miRNA的转录水平。传感器在感应到miRNA时能够发射荧光信号,即可知道该细胞中miRNA的量,达到定量检测的目的。 2.对感染细胞进行荧光探针检测 将构建好的纳米传感器引入到癌细胞体内,确定检测miRNA的浓度范围和最佳反应时间。并对其进行荧光探针检测,以验证传感器的灵敏度和特异性。 3.对纳米传感器的性能进行评价 利用荧光显微镜和流式细胞术检测纳米传感器对miRNA的识别能力、检测限度、特异性和稳定性等性能指标,评价纳米传感器的性能。 任务重点: 1.纳米传感器设计和构建 利用合成生物学方法设计和构建合适的纳米传感器,对纳米传感器进行表征,并确定其最佳操作条件。 2.感染细胞荧光探针检测 通过荧光探针检测对感染细胞进行miRNA检测,验证纳米传感器的灵敏度和特异性。 3.纳米传感器性能评价 通过荧光显微镜和流式细胞术检测纳米传感器的各项性能参数,评价纳米传感器的性能。 任务难点: 1.纳米传感器的设计和构建 纳米传感器的设计和构建是本任务的关键,要通过合成生物学方法设计和构建一种合适的纳米传感器,对传感器进行表征和优化,以获得良好的检测性能。 2.选择合适的癌细胞 为了验证纳米传感器的性能和可行性,需要选择合适的癌细胞,探究传感器在不同癌细胞中的检测能力和表现差异。 3.纳米传感器的性能评价 评价纳米传感器的各项性能指标需要涉及到各个方面的技术和知识,要深入了解荧光显微镜和流式细胞术等技术的基本原理和实验操作技能,确保评价结果的准确和可靠。 参考文献: 1.QianZ,TaoJ,LiS,etal.DetectionandquantificationofmicroRNAsusingsurface-enhancedRamanspectroscopy.Analyticalchemistry,2014,86(23):11562-11569. 2.QinY,HuR,XuL,etal.UltrasensitivedetectionofmicroRNA-21insituinlivingcellsbyagraphene-MnO2nanocomposite-basedFRETaptasensor.JournaloftheAmericanChemicalSociety,2014,136(7):2731-2737. 3.LiY,HuX,HuangY,etal.Plasmon-controlledfluorescence:beyondtheintensityenhancement.Small,2015,11(26):3097-3105.