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姜黄素对脉胳膜黑色素瘤细胞OCM-1血管生成拟态的抑制作用
摘要：脉胳膜黑色素瘤是一种恶性肿瘤，具有高度转移和血管生成能力，给临床治疗带来巨大挑战。近年来，针对血管生成的抑制剂成为研究的热点，而姜黄素作为一种天然产物，在肿瘤治疗中表现出良好的抑制血管生成的效果。本研究探讨了姜黄素对脉胳膜黑色素瘤细胞OCM-1的血管生成拟态的抑制作用。结果表明，姜黄素可以显著抑制OCM-1细胞的血管生成能力，且该效应与抑制血管生成因子（VEGF）和丝裂原活化蛋白激酶（ERK）信号通路有关。这表明，姜黄素具有良好的潜力作为抑制脉胳膜黑色素瘤的治疗药物。
关键词：脉胳膜黑色素瘤；血管生成；姜黄素；VEGF；ERK。
引言
脉胳膜黑色素瘤是一种具有高度转移和血管生成能力的恶性肿瘤，患者的预后非常差。目前临床上的治疗方法主要是外科手术去除肿瘤和放射治疗，但是对于晚期病人，这些方法的效果非常有限。因此，研究探索针对脉胳膜黑色素瘤的新治疗方法具有广泛的意义。其中，针对肿瘤血管生成的抑制成为了一个重要的研究方向。
肿瘤血管生成是一种重要的生物过程，它可以为肿瘤提供所需的氧气和营养物质，同时也提供了肿瘤细胞侵入周围组织和远处转移的通道。因此，抑制肿瘤血管生成已经成为了肿瘤治疗的一个重要策略。VEGF是一个重要的血管生成因子，它在发生肿瘤血管生成过程中发挥着关键的作用。ERK途径是一个包括Ras-MEK-ERK链的信号传导途径，这个途径在肿瘤细胞的增殖、转移和血管生成中也具有重要的作用。
姜黄素是一种天然产物，具有多种生物学效应，包括抑制肿瘤细胞增殖、促进细胞凋亡、抑制炎症反应等。近年来，也有研究表明，姜黄素具有良好的抑制肿瘤血管生成的作用。本研究旨在探讨姜黄素是否具有抑制脉胳膜黑色素瘤细胞的血管生成能力，并探究其作用机制。
材料与方法
细胞培养
OCM-1细胞系分别在10%FBS的DMEM中进行培养，并在37℃的CO2孵化箱中培养。
细胞增殖实验
将OCM-1细胞分别种植在96孔板中，加入不同浓度的姜黄素（0，5，10，20，40和80μM），培养3天后加入MTT试剂。将细胞孵育至1小时，将96孔板在450nm处读取并绘制折线图以显示细胞的增殖情况。
细胞迁移实验
在24孔板中细胞以密度约为50万个/ml的浓度进行培养，并形成伤口。然后加入不同浓度的姜黄素（0、5、10和20μM）并继续培养24小时。通过测量伤口的区域变化记录细胞的迁移能力。
管生成实验
将Matrigel置于96孔板中，并添加OCM-1细胞。细胞培养4小时后再加入不同浓度的姜黄素（0、5、10、20和40μM）。将板培养至24小时后，使用显微镜观察管生成。
Westernblot分析
将OCM-1细胞放置在6孔板中，并添加不同浓度的姜黄素（0、5、10和20μM）进行培养24小时。将细胞收集并分离蛋白，进行Westernblot分析以确定VEGF和ERK在基因和蛋白水平上的表达情况。
结果
姜黄素对OCM-1的细胞增殖和迁移的影响
MTT实验结果表明，姜黄素可以显著抑制OCM-1的增殖，而抑制率随着药物浓度的增加而加强。在姜黄素浓度为20μM时，细胞存活率降至50%。且通过细胞迁移实验可以发现，随着姜黄素的浓度增加，OCM-1细胞迁移的速度逐渐减缓，最后呈现出非常明显的抑制现象（图1）。
姜黄素对OCM-1的管生成的影响
通过管生成实验，可以发现姜黄素可以显著抑制OCM-1的管生成能力。在姜黄素浓度为20μM时，可以明显地鉴定出管生成显著低于对照组（图2）。
姜黄素对VEGF和ERK表达的影响
Westernblot分析结果表明，随着姜黄素浓度的增加，OCM-1的VEGF和ERK表达下降明显。当姜黄素浓度为20μM时，VEGF和ERK的表达下降明显，同时也对OCM-1的管生成能力有明显的抑制作用（图3）。
讨论
本研究的结果表明，姜黄素可以显著抑制OCM-1的增殖、迁移和管生成能力。这与其他研究的结果相符，说明姜黄素在肿瘤治疗中具有良好的抑制血管生成的效果。此外，我们还发现，在VEGF和ERK信号通路中存在着姜黄素的抑制作用。这表明，姜黄素可能通过抑制这些信号通路来实现其抑制血管生成的作用。
然而，在本研究中，我们仅仅探究了姜黄素对脉胳膜黑色素瘤细胞OCM-1的影响。对于其他类型的肿瘤细胞，姜黄素的作用是否相同还需要进一步的研究。此外，在使用姜黄素作为治疗药物时，其潜在的毒性和副作用还需要进一步的研究。
结论
本研究的结果表明，姜黄素可以显著抑制OCM-1细胞的管生成能力，且其作用与VEGF和ERK信号通路的抑制有关。这些结果表明，姜黄素具有良好的潜力作为针对脉胳膜黑色素瘤的治疗药物。未来，还需要进一步的研究来确定其潜在的毒性和副作用，以便更好地将其应用于临床治疗中。
参考文献
TangC,