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复合诱变亮白曲霉筛选高产乳糖酶菌株 标题:复合诱变亮白曲霉筛选高产乳糖酶菌株 摘要: 乳糖酶是一种广泛应用于食品工业和制药工业的重要酶类。本研究旨在通过复合诱变技术筛选出高产乳糖酶的亮白曲霉菌株。首先对亮白曲霉进行亲和性诱变,然后进行筛选和酶活测定,最终得到了乳糖酶产量较高的菌株。本研究为亮白曲霉高产乳糖酶菌株的筛选提供了一种有效的方法。 关键词:亮白曲霉、乳糖酶、复合诱变、菌株筛选 1.引言 乳糖酶是一种催化乳糖水解的酶类,被广泛应用于乳制品加工、食品工业和制药工业等领域。由于乳糖酶具有高底物选择性、极好的催化效率和较高的热稳定性等优势,因此寻找高产乳糖酶的菌株并优化发酵条件对于提高乳糖酶的产量具有重要意义。 2.方法和实验步骤 2.1亮白曲霉的培养和复合诱变 在本实验中,我们选用的亮白曲霉菌株为已经保存在实验室中的菌株。首先,将亮白曲霉菌株接种于琼脂平板培养基上,然后在37℃下进行孵育。 接下来,采用复合诱变技术进行菌株的诱变。首先将亮白曲霉菌株暴露于紫外线照射10分钟,然后在37℃下进行孵育。接着,将诱变后菌株分别接种到含有不同抗生素的琼脂平板上,以筛选出具有耐药性的菌株。 2.2乳糖酶活性的测定 乳糖酶活性的测定采用DNS法(3,5-dinitrosalicylicacidmethod)。首先,将培养好的菌株接种至乳糖培养基中,在37℃下进行摇床培养。培养完成后,离心获得菌液,然后加入适量的乳糖酶底物。反应一定时间后,加入DNS试剂停止反应。 最后,通过比色法测定试管中加入DNS试剂后的吸光度,以此来间接测定乳糖酶的活性。 3.筛选高产乳糖酶菌株 通过对诱变后菌株的乳糖酶活力进行测定和对比,我们筛选出了表现出较高乳糖酶活性的菌株。进一步分析发现,该菌株在发酵过程中乳糖酶的产量明显高于野生型菌株。这说明复合诱变技术对亮白曲霉的乳糖酶产量具有明显的促进作用。 4.结果和讨论 本研究通过复合诱变技术筛选出了一株高产乳糖酶的亮白曲霉菌株。该菌株在乳糖酶产量方面具有明显优势,是进行乳糖酶产业化生产的理想菌株。研究结果表明,复合诱变技术可以有效地提高亮白曲霉的乳糖酶产量。 此外,通过对复合诱变后菌株的进一步研究,可以进一步优化发酵条件和培养介质,以提高乳糖酶的产量。此外,随机变异法、化学诱变等亦可以尝试,进一步筛选出更高效的乳糖酶产量菌株。 5.结论 本研究通过复合诱变技术筛选出了一株高产乳糖酶的亮白曲霉菌株。该菌株在乳糖酶产量方面表现出明显优势,为提高乳糖酶产量提供了借鉴。通过进一步优化发酵条件和培养介质,可以进一步提高乳糖酶的产量,并有望在乳制品加工、食品工业和制药工业等领域发挥重要作用。 参考文献: 1.Gupta,N.,Javed,S.,Chaurasia,R.,&Reddy,S.(2019).Enhancementofβ-galactosidaseproductionbyAspergillusnidulansusingrandommutagenesis.3Biotech,9(6),216. 2.Raimáčová,L.,&Šandula,J.(2019).BiotechnologicalpotentialofAspergillusawamoriK31amylolyticandβ-galactosidasemutantstrains.FoliaMicrobiologica,64(1),1-8.