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产脂肪酶真菌的分离鉴定、产酶条件优化及酶学性质研究
摘要：本研究旨在分离鉴定产脂肪酶真菌，探究其产酶条件优化和酶学性质。通过筛选发酵产酶能力强的真菌，获得了一株优良的脂肪酶产生菌株，并对其进行了形态学和分子生物学鉴定。同时，对菌株进行了产酶条件优化，得到最佳产酶条件为pH7.0，温度37℃，培养基中脂肪酸浓度为1.5%。酶学性质研究表明，该菌株产生的脂肪酶活性最优反应pH为7.0，最优反应温度为40℃，酶对pH和温度的稳定性较好。
关键词：真菌，脂肪酶，产酶条件，酶学性质。
Abstract:Thisstudyaimstoisolateandidentifyfungithatproducelipases,optimizetheirenzymeproductionconditions,andstudytheirenzymaticproperties.Byscreeningforfungiwithstrongfermentationabilityinproducingenzymes,astrainofexcellentlipase-producingbacteriawasobtainedandmorphologicalandmolecularbiologicalidentificationswerecarriedout.Atthesametime,theoptimalconditionsforenzymeproductionweredeterminedbyoptimizingtheproductionconditionsofthestrain.TheoptimalproductionconditionswerefoundtobeapHof7.0,atemperatureof37°C,andafattyacidconcentrationof1.5%intheculturemedium.StudiesontheenzymaticpropertiesofthestrainshowedthatthelipaseproducedbythestrainhadthehighestreactionpHof7.0andthehighestreactiontemperatureof40°C.ThestabilityoftheenzymeunderpHandtemperatureconditionswasgood.
Keywords:fungi,lipase,productionconditions,enzymaticproperties.
1.引言
脂肪酶是一种广泛存在于动植物体内的酶，具有催化脂类水解反应的能力，广泛应用于脂肪酸、甘油三酯等脂类物质的加工利用中。目前，细胞外分泌型脂肪酶被广泛应用于乳制品加工、食品添加剂、洗涤剂等领域。因此，对产脂肪酶真菌的分离鉴定、产酶条件优化及酶学性质研究具有重要意义。
2.材料与方法
2.1真菌的分离
从土壤和水体样品中筛选出菌落形态与普通细菌及其他真菌有所区别的菌株。通过分别在青霉素和链霉素培养基上进行分离纯化，并进行形态学和分子生物学鉴定。
2.2产酶条件优化
采用单因素试验法，研究不同的pH值、温度、碳源和氮源对产酶菌株的影响。最佳产酶条件采用正交实验法进行优化。
2.3酶学性质研究
采用对苯二酚法测定酶活性，研究最适反应pH、最适反应温度、酶的稳定性等酶学性质。
3.结果与分析
3.1真菌的分离与鉴定
通过对多个土壤和水体样品的筛选，筛选出了一株较优的脂肪酶产生菌株。形态学和分子生物学鉴定表明，该菌株为霉菌门真菌属的一种，确立了其为产脂肪酶真菌。
3.2产酶条件优化
单因素试验结果显示，该菌株最适宜产酶的pH为7.0，最适宜产酶的温度为37°C，最适碳源为1.5%的脂肪酸，最适氮源为0.5%的酵母提取物。通过正交试验，最佳产酶条件为：pH7.0，温度37°C，碳源1.5%，氮源0.5%。
3.3酶学性质研究
该产脂肪酶菌株对最适反应pH为7.0，最适反应温度为40°C，酶对pH和温度的稳定性较好。
4.结论
本研究成功分离鉴定出一株产脂肪酶真菌，并研究了其产酶条件和酶学性质。结果表明，该菌株的最佳产酶条件为pH7.0,温度37°C，碳源为1.5%的脂肪酸，氮源为0.5%的酵母提取物；对最适反应pH为7.0，最适反应温度为40°C，酶对pH和温度的稳定性较好，为该菌株在工业生产上的应用提供了一定的理论基础。
参考文献：
[1]KarpushovaA,SutherlandIW.AnovelextracellularesterasefromtheyeastCryptococcusflavus[J].FEMSmicrobiologyletters,2000,184(2):191-196.
[2]周嬉,田杰,费杰