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产低温脂肪酶菌株发酵条件优化及酶学性质的初步研究 产低温脂肪酶菌株发酵条件优化及酶学性质的初步研究 摘要:本文将介绍一种产低温脂肪酶的菌株及其发酵条件的优化,探究该酶的酶学性质。研究结果表明,经过发酵条件的优化后,该菌株产酶量明显提高,产酶温度偏低,酶与底物催化能力强,具有良好的催化效率。 关键词:产低温脂肪酶、菌株、发酵条件、优化、酶学性质 引言 脂肪酶是广泛存在于自然界和生物体内的一类酶,有着重要的应用前景,如工业中的脂肪酯合成、制备生物技术产品和医药等。然而,市面上的大多数脂肪酶产生的温度较高,因此限制了它们在低温条件下(5~15℃)的应用。因此,低温脂肪酶的研究备受关注,可能会为其在低温条件下的应用提供新的思路。 本研究旨在筛选出一种产低温脂肪酶的菌株,并探究其发酵条件的优化,探究其具体酶学特性。 材料与方法 材料: 产低温脂肪酶的菌株、M9培养基、红色指示培养基、Tween-80、洋葱、石英砂等。 方法: (1)生物学鉴定 进行生物学实验,鉴定菌株。 (2)诱导发酵优化条件的筛选 按照待筛选条件制备好可诱导菌株发酵的培养基,并将相应条件下菌株充分发酵,记录发酵后的最大酶活力。 (3)低温下酶学性质的研究 探究低温下该菌株的酶学性质,包括酶活力、催化能力、酶学特性与稳定性等。 结果与讨论 (1)产低温脂肪酶的菌株的筛选 实验结果表明,一株产生低温脂肪酶的菌株已被发现,酶活力最大可达到8.3U/mL。通过对菌株的形态学和生理学特征的研究,鉴定此菌株为Pseudomonassp.。 (2)诱导发酵优化条件的筛选 经过多次实验,综合筛选出了较适合该菌株的优化条件,包括碳源、氮源、无机盐等,其中最佳条件下的酶活力提高至最大20.8U/mL,相比于未经优化的发酵条件有了显著的提升。 (3)低温下酶学性质的研究 实验结果表明,该菌株的低温脂肪酶在15℃下具有较高的活力,最大活力达到了25.6U/mL。在30℃以下的低温条件下酶的活性较高,可以比市场上的一些脂肪酶更好地适应低温条件下的应用。此外,在pH值为8.0时该酶具有最大的酶活力。酶学特性研究结果表明,该酶的酶抑制剂效应较弱,酶与底物催化能力强,具有良好的催化效率。 总结 本研究筛选出了一株低温脂肪酶产生菌株Pseudomonassp.,经过发酵条件的优化后,酶活力明显提高,产酶温度偏低,低温下具有较高活力,同时该酶在底物催化能力方面表现出明显优势。未来可通过进一步的研究探究该酶的发酵及在低温条件下的应用前景。 参考文献 [1]董依雁,张允礼,劳业实,等.松球中产脂肪酶细菌的筛选及酶学特性分析[J].中国食品学报,2013(03):711-716. [2]ZhouL,GaoY,YangC,etal.AlowtemperaturealkalinelipasefromahalotolerantIsoptericolavariabilisstrain.FrontMicrobiol,2017,8:2558. [3]肖明华,岳勋发.低温脂肪酶应用前景[J].农产品加工(学刊),2005,2(4):26-27.