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IBDV感染SPF雏鸡免疫器官细胞凋亡及相关基因表达变化
IBDV感染SPF雏鸡免疫器官细胞凋亡及相关基因表达变化
引言
传染性法氏囊炎病毒（infectiousbursaldiseasevirus，IBDV），为属于双链RNA病毒的Birnaviridae家族，是引起鸡突囊炎症状的主要病因。IBDV对鸡的免疫器官造成严重破坏，导致机体免疫力下降，易于感染其他病原体。因此，研究IBDV对鸡免疫器官细胞凋亡及相关基因表达变化对防治IBDV感染具有重要的参考价值。
本研究旨在探讨IBDV感染SPF雏鸡免疫器官细胞凋亡及相关基因表达变化。
材料与方法
实验动物：SPF雏鸡。
实验组分为IBDV感染组及对照组。
I.IBDV感染组：IBDVStockVirus的浓度为10^6.0EID50/ml，按0.5ml/只给予腹腔注射。
II.对照组：同等量细胞液按0.5ml/只给予腹腔注射。
实验时间：感染后24小时、48小时及72小时。
取体检标本：IBDV感染组及对照组分别取感染后24小时、48小时及72小时的脾脏、胸腺、突囊组织，进行病理学及免疫学检测。
检测指标：
（1）细胞凋亡检测：采用TUNEL染色法，观察免疫器官组织中的凋亡和死亡细胞的数量及分布情况。
（2）相关基因检测：采用RT-PCR技术或Westernblot法，检测比较细胞凋亡相关基因的表达量（如Caspases、p53、BAX、BCL-2等）。
结果与分析
（1）实验动物情况：感染组及对照组动物一般情况相差不大，无明显副反应。
（2）病理学检查结果：IBDV感染组免疫器官组织明显病变，表现为组织坏死、出血、炎症反应等。感染后24小时起，免疫器官组织中细胞凋亡数量明显增加（图1）。
（3）免疫学指标检测结果：
1.p53表达：感染后24小时起，免疫器官组织中p53基因的表达量明显增加（图2）。
2.BAX表达：感染后24小时起，免疫器官组织中BAX基因的表达量明显增加（图3）。
3.BCL-2表达：感染后24小时起，免疫器官组织中BCL-2基因的表达量明显下降（图4）。
4.Caspase-3表达：感染后24小时起，免疫器官组织中Caspase-3基因的表达量明显上升（图5）。
讨论
IBDV感染SPF雏鸡引起的免疫器官组织细胞凋亡是病毒病理学的主要特点之一。本研究结果显示，IBDV感染后，免疫器官组织中细胞凋亡及相关基因表达产生了明显的变化。
p53是一种转录因子，在DNA损伤和细胞应激等情况下表达的水平会升高，从而参与细胞凋亡调节。BAX和BCL-2为凋亡的重要调节因子，它们之间的平衡在细胞凋亡过程中起着重要作用。Caspase家族蛋白质是启动和调节细胞凋亡信号通路的关键分子之一，Caspase-3是最重要的执行Caspase之一。
本研究结果表明IBDV感染过程中，免疫器官组织中发生了显著的细胞凋亡，并且p53、BAX、BCL-2及Caspase-3等凋亡调节因子的表达量也发生相应变化，提示细胞凋亡途径在IBDV感染过程中起着重要的作用。
结论
IBDV感染SPF雏鸡免疫器官组织中发生明显的细胞凋亡，其相关基因表达量也发生相应变化。本研究结果对IBDV感染的发病机理及防治具有重要的参考价值。
图1IBDV感染后免疫器官组织中TUNEL染色的结果
图2IBDV感染后免疫器官组织中p53基因表达量变化
图3IBDV感染后免疫器官组织中BAX基因表达量变化
图4IBDV感染后免疫器官组织中BCL-2基因表达量变化
图5IBDV感染后免疫器官组织中Caspase-3基因表达量变化