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DHA诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡及其作用机制研究
摘要：本研究旨在探讨DHA对胃癌细胞SGC-7901的凋亡诱导作用及其作用机制。采用MTT法检测DHA对SGC-7901细胞的生长抑制作用，采用流式细胞术检测DHA对SGC-7901细胞凋亡率的影响，Westernblot检测DHA对SGC-7901细胞凋亡途径相关蛋白表达的影响。结果显示，DHA可显著抑制SGC-7901细胞的生长，并且在一定浓度范围内DHA可有效诱导SGC-7901细胞凋亡。此外，DHA还可以通过调节凋亡途径相关蛋白Bax，Bcl-2，Caspase-3，Caspase-9及PARP的表达，发挥其对SGC-7901细胞凋亡的诱导作用。本研究表明，DHA可以通过诱导凋亡途径的激活来实现对胃癌细胞SGC-7901的凋亡诱导作用，有望成为新的治疗胃癌的方法。
关键词：DHA，胃癌，凋亡，Bax，Bcl-2，Caspase-3，Caspase-9，PARP
Abstract:ThisstudyaimstoexploretheeffectofDHAontheapoptosisinductionofgastriccancercellsSGC-7901anditsmechanismofaction.MTTwasusedtodetectthegrowthinhibitionofSGC-7901cellsbyDHA,flowcytometrywasusedtodetecttheimpactofDHAonapoptosisrateofSGC-7901cells,andWesternblotwasusedtodetecttheeffectofDHAonapoptosis-relatedproteinsexpressionofSGC-7901cells.TheresultsshowthatDHAcansignificantlyinhibitthegrowthofSGC-7901cells,andwithinacertainconcentrationrangeDHAcaneffectivelyinduceSGC-7901cellapoptosis.Inaddition,DHAcanalsoinduceapoptosisofSGC-7901cellsbyregulatingtheexpressionofapoptosis-relatedproteinsBax,Bcl-2,Caspase-3,Caspase-9andPARP.ThisstudyshowsthatDHAcaninduceapoptosisofgastriccancercellsSGC-7901byactivatingtheapoptosispathway,andisexpectedtobecomeanewmethodforthetreatmentofgastriccancer.
Keywords:DHA,gastriccancer,apoptosis,Bax,Bcl-2,Caspase-3,Caspase-9,PARP
引言：胃癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，其发病率及死亡率在世界范围内均居高不下。胃癌有着较高的转移率，常发生远处转移，早期发现早期治疗常被忽略，治疗效果不佳。因此，发现有效的新药物治疗胃癌成为当今研究的热点问题之一。近年来，越来越多的研究表明，来自鱼类、豆类、藻类和某些植物中的Omega-3脂肪酸对肿瘤的预防和治疗具有重要的意义，其中DHA是一种重要的Omega-3脂肪酸成分。然而，有关DHA对胃癌的治疗作用及其机制的报道还不多。因此，本研究旨在探讨DHA对胃癌细胞SGC-7901的凋亡诱导作用及其机制。
材料与方法：
实验材料
DHA（95%），SGC-7901胃癌细胞，RPMI-1640培养基，10%胎牛血清（FBS），细胞凋亡检测试剂盒，Westernblot试剂盒。
实验方法
1.细胞培养
SGC-7901细胞在RPMI-1640培养基中添加10%FBS，在37℃恒温培养箱内培养至细胞密度达到80%。
2.MTT法测定细胞生长抑制
将SGC-7901细胞按密度10000个/ml放入96孔板中，不同浓度的DHA处理细胞，分别为0、5、10、20、40、80μM，处理后细胞孵育37℃恒温培养箱中，0h、24h、48h后分别加入MTT的标准物质，孵育4h，去除原液不含灰色的DMEM培养基，加入200μlDMSO混匀轻摇15min。取出200ul，放入96孔板中，检测波长，在540nm波长下分别测定吸光度值。
3.流式细胞术分析
按照厂家提供的说明书，使用细胞凋亡检测试剂盒，用流式细胞术分析检测细胞凋亡率。
4.Westernblot检测
处理细胞，抽提细胞蛋白，电泳分离，转移膜，使用抗体进行染色，并用