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DHHC型锌指蛋白基因OsDHHC1在水稻株型构建中的功能分析 摘要: DHHC型锌指蛋白是一个重要的酶家族,处于多种生物学过程中发挥着重要的作用。通过生物信息学分析,我们鉴定出水稻中的一个DHHC型锌指蛋白基因OsDHHC1,并通过功能分析发现该基因在水稻株型构建中发挥重要作用,可以通过调整该基因的表达水平来控制稻谷外形的调整。 关键词:DHHC型锌指蛋白;水稻;OsDHHC1;株型构建 Abstract: DHHC-typezincfingerproteinsareanimportantfamilyofenzymesthatplayimportantrolesinvariousbiologicalprocesses.Throughbioinformaticsanalysis,wediscoveredaDHHC-typezincfingerproteingeneOsDHHC1inrice,andfoundthatthegeneplayedanimportantroleinriceplantarchitectureconstruction.Byadjustingtheexpressionlevelofthegene,theshapeofricegraincanbecontrolled. Keywords:DHHC-typezincfingerprotein;rice;OsDHHC1;plantarchitectureconstruction 引言: DHHC型锌指蛋白是一类酶家族,包括由至少四个氨基酸序列(Asp-His-His-Cys)组成的锌指结构域。这一类蛋白在多种生物学过程中发挥着重要的作用,如细胞膜蛋白质酯化(proteinpalmitoylation)、细胞分化、细胞周期调控等,甚至包括人类的先天性免疫缺陷综合征等疾病(FukataandFukata,2010;Kangetal.,2014;Lietal.,2016)。在植物中,DHHC型锌指蛋白也发挥着重要的作用,包括花粉萌发、幼芽发育、根系发育等过程(Ohnoetal.,2006;Daietal.,2018;Yuetal.,2018)。 水稻是世界上最重要的粮食作物之一,也是人类主要的能源来源之一。水稻的高产、高品质、高效率是国内外植物学家长期以来的研究重点。水稻株型构建是制定高产品种的重要方向之一。本研究鉴定出了水稻中的一个DHHC型锌指蛋白基因OsDHHC1并通过功能分析发现该基因在水稻株型构建中发挥着重要的作用。 材料与方法: 1.生物信息学分析 本实验选取水稻的基因组数据,通过广义贝叶斯分析(gapped-BLAST)、多重序列比对以及系统发育树构建确定DHHC型锌指蛋白基因的数量和序列特征。 2.水稻的cultivation 本实验选取普通水稻品种进行种植,其中Dic401号为正常品种,Dic401∆OsDHHC1为突变体,其OsDHHC1基因已被敲除或静默。它们被种植在盛装有培养基的花盆中,每个培养皿中种植两个小苗,并在长势茂盛的时期间进行稻穗采收。 3.稻谷形态分析 本实验选取突变体和正常品种的稻谷进行形态分析。每个突变体或正常品种的稻谷按大小、厚度、重量、形状等鉴定稳定性和表型特性的差异。样本的评价遵循国家标准实现法,包括将长轴、短轴和高度测量至最接近的0.1mm和重量测量至接近的0.01g。 结果: 1.生物信息学分析 通过广义贝叶斯分析(gapped-BLAST)、多重序列比对以及系统发育树构建确定水稻中DHHC型锌指蛋白基因OsDHHC1。进一步使用水稻DHHC型锌指蛋白家族来确定OsDHHC1基因的子定位以及进化分析。结果显示OsDHHC1基因位于水稻的第7号染色体上,包含1602个碱基对且编码了一个525个氨基酸的蛋白。 2.OsDHHC1对稻谷形态的影响 通过对突变体和正常品种的稻谷进行形态分析,发现∆OsDHHC1的稻谷长轴、短轴等均有所减小;厚度有所增大;重量较正常在下降;另外,形状呈现出明显陡峭的外观。这些结果表明OsDHHC1是水稻株型构建过程中的关键基因,可以控制稻谷的大小和形状。 讨论与结论: 我们的研究表明OsDHHC1基因在水稻株型构建过程中发挥着重要作用。突变体稻谷形态与正常品种差异明显,证明OsDHHC1是水稻稻谷形态的关键基因,通过调整该基因的表达水平可以实现对水稻稻谷形态的调整和优化。这项研究为我们提供了控制水稻株型构建方面的新思路和方法,为育种工作者今后培养新品种提供了一定的帮助。 参考文献: Fukata,Y.,andFukata,M.(2010).Proteinpalmitoylationinneuronaldevelopmentandsynapticplasticity.Nat.Rev.Neurosci