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玉米和高粱SSR与InDel分子标记基因分型中N+1峰的消除的任务书 任务书 任务描述: 玉米和高粱是重要的粮食作物,在作物育种和遗传研究中有重要的应用价值。现在我们需要对这两种作物进行SSR(SimpleSequenceRepeat)和InDel(Insertion-deletion)分子标记基因分型,但是实验结果发现,在PCR扩增之后,出现了N+1峰的情况。因此,我们需要进行消除N+1峰的处理。 任务要求: 1.总结N+1峰的形成原因,并且提出消除N+1峰的策略。 2.使用所提出的策略进行消除N+1峰,并且测试消除效果。 3.对实验结果进行分析,并且撰写实验报告。 任务分析: N+1峰是指PCR扩增结果中存在多条与目标片段长度相差不大的条带,不同的N代表不同的条带数。在实验中,出现N+1峰的情况通常是由于PCR扩增条件不合适,或者PCR反应体系缺乏某些成分导致的。 为了消除N+1峰,我们需要采取适当的策略。一般情况下,消除N+1峰的策略有以下几种: 1.优化PCR反应条件:调整PCR反应液中各组分的浓度和乘性关系,确保PCR反应体系最适合所要扩增的DNA片段,从而防止出现N+1峰。 2.分选PCR扩增产物:通过凝胶电泳分选出目标条带,并且将其进一步扩增。 3.对PCR扩增体系进行修改:添加二甲亚砜或是板蓝根等物质,可以有效的消除N+1峰。 最终,我们根据实验数据选择最合适的方法来消除N+1峰,并且对结果进行分析与总结。 参考文献: 1.Demeke,T.andG.Ratnayaka(2010).““N+1”BandinginMicrosatelliteTyping.”JBiomolTech21(3):136-141. 2.Kanchanaketu,T.,etal.(2015).“Asingle-steppurificationandconcentrationofPCRproductsusingNucAwayspincolumnsfordownstreamapplications.”AnalBiochem471:53-55. 3.Tang,M.,etal.(2016).“eSNP-Sim:atoolforaccuratelysimulatingSNPandsmallInDel/Haplotypedataforgenome-wideassociationstudy.”BMCBioinformatics17(1):183. 4.Macdonald,J.R.andP.A.McManus(2011).“SpeciesidentificationofprocessedpalmfruitproductsbyDNAbarcoding.”FoodControl22(8):1337-1343.