基因内miR-135a-12自身转录调控机制的研究的开题报告.docx

基因内miR-135a-12自身转录调控机制的研究的开题报告
1.研究背景及意义
近年来，非编码RNA（non-codingRNA,ncRNA）越来越受到科学家的关注，其中包括微型RNA（microRNA,miRNA）是一种非常常见的ncRNA。miRNA是一类长度为18-24个核苷酸的RNA，具有调控基因表达的重要作用。研究表明，miRNA与多个疾病的发生、发展、治疗密切相关，因此对miRNA的研究已成为生命科学的热点之一。miR-135a作为一种miRNA，在调控多个生物过程中发挥着重要作用。
miR-135a-1和miR-135a-2分别位于人类基因组上的3号染色体和12号染色体，而miR-135a-12是miR-135a-1和miR-135a-2的结合体。然而，miR-135a-12自身转录调控机制尚不清楚。因此，对miR-135a-12自身转录调控机制的研究具有重要意义。
2.研究内容及方法
本项目计划采用以下实验方法开展对miR-135a-12自身转录调控机制的研究：
1）构建miR-135a-12表达载体，包括miR-135a-12启动子、miR-135a-12miRNA编码序列、miR-135a-12终止子等元件；
2）将miR-135a-12表达载体转染至不同细胞系，包括Hela、HEK293、A549等细胞系；
3）采用荧光定量PCR技术和蛋白质免疫印迹技术等方法，检测miR-135a-12表达水平以及miR-135a-12启动子和miR-135a-12miRNA编码序列对miR-135a-12表达的影响；
4）通过染色质免疫沉淀技术（chromatinimmunoprecipitation,ChIP）和电动迁移电位等技术，探究miR-135a-12调节转录因子的分子机制。
3.研究预期结果
本研究旨在深入探究miR-135a-12自身转录调控机制，并对相关分子机制进行初步分析。预期结果包括以下几点：
1）构建了miR-135a-12表达载体，并成功转染至不同细胞系；
2）检测到miR-135a-12的表达水平，并初步探究了miR-135a-12的自身转录调控机制；
3）初步研究了miR-135a-12调节转录因子的分子机制，对miR-135a-12在生物体内的功能及其分子机制有了深入的认识。
4.研究意义
本研究可以增加人们对miRNA参与不同生物过程中的调控机制的认识，为相关疾病的发生和治疗提供参考；同时，本研究对于深入探究miRNA的调控机制、认识细胞分子调节机制等方面都具有重要的意义。