转DGAT1基因小鼠与野生型小鼠腓肠肌差异表达基因的筛选与分析的开题报告.docx

转DGAT1基因小鼠与野生型小鼠腓肠肌差异表达基因的筛选与分析的开题报告
一、选题背景
DGAT1（Diacylglycerolacyltransferase1）是合成三酰甘油（TAG）的重要酶，通过催化脂肪酸和甘油醇3-磷酸的反应合成TAG。DGAT1是TAG生物合成的关键酶，多种实验表明其对肥胖、耐热性和繁殖能力等方面的作用具有重要影响。因此，DGAT1逐渐成为重要的研究方向。
本次选题主要研究转DGAT1基因小鼠与野生型小鼠腓肠肌差异表达基因的筛选与分析，旨在探究DGAT1酶的作用和调控机制，丰富对它生物学功能的认识，为进一步研究DGAT1在其他生理和病理过程中的作用提供基础研究依据。
二、研究流程
（1）实验材料的准备：涉及到小鼠实验，需要获取正常野生型小鼠和转DGAT1基因小鼠并进行处理。同时，还需要采集小鼠腓肠肌样本和总RNA。
（2）RNA提取：从小鼠腓肠肌中提取RNA，保证RNA提取质量，避免下游实验的干扰。
（3）RNA质量的检测：使用260nm光谱测量RNA浓度，检测RNA的完整性和降解情况。
（4）构建文库：通过对RNA进行反转录，提取cDNA，并使用150bp对应的PE芯片进行测序，生成原始数据。
（5）数据处理：利用基因差异表达分析工具，处理原始数据，筛选出差异表达的基因。
（6）差异基因功能注释和通路分析：对筛选出来的差异基因进行功能注释和通路分析，探究DGAT1酶的作用和表达信号通路。
（7）实验数据验证：对筛选出来的差异基因进行RT-PCR实验，验证差异表达的可靠性和准确性。
三、研究意义
本研究通过筛选出DGAT1酶作用过程中差异表达的基因，从而探究DGAT1在腓肠肌发育和生长发育等过程中的生物学功能和作用机理，为进一步认识DGAT1在人和动物的生理和病理过程中的作用奠定基础；同时在丰富DGAT1酶的生物学功能领域，对精细调控DGAT1酶的表达和作用提供研究基础。