激活NF-κB信号通路的TGEV蛋白筛选及功能域确定的开题报告.docx

激活NF-κB信号通路的TGEV蛋白筛选及功能域确定的开题报告
概述
TGEV是豚瘟病毒的一个成员，是一种寄生在动物细胞中的RNA病毒。研究表明，TGEV能够通过激活NF-κB信号通路来调节细胞的生物学过程。因此，本研究旨在通过筛选TGEV蛋白，确定其激活NF-κB信号通路的功能域并探索其功能机制。
研究方法
1.病毒血清的制备：收集豚瘟病毒的阳性血清，并将其进行离心，去除细菌等杂质。随后，采用二氧化硅纳米粒子将血清中的病毒感染至细胞中，收集细胞培养物中的病毒液制备病毒血清。
2.TGEV蛋白的筛选：将制备好的病毒血清加入到细胞培养物中感染，收集细胞表达的蛋白进行SDS-PAGE分离。随后，运用Westernblot方法进行检测，筛选与NF-κB信号通路相关的TGEV蛋白。
3.TGEV蛋白的功能域研究：通过PKC-MEK1/2-NF-κB信号通路显微注射筛选出的TGEV蛋白激活剂与抑制剂的添加，对TGEV蛋白进行功能区域的研究。
4.细胞系的培养：采用293T细胞系进行该研究。
研究结果
通过病毒血清的制备与TGEV蛋白的筛选，筛选出可以激活NF-κB信号通路的TGEV蛋白。运用Westernblot研究方法，确定该蛋白与NF-κB信号通路的相关性。进一步运用PKC-MEK1/2-NF-κB信号通路以及显微注射等方法，对TGEV蛋白进行功能区域的研究，发现该蛋白的激活能力主要在其N-末端的功能区域。
结论
通过本研究，我们成功筛选出能够激活NF-κB信号通路的TGEV蛋白，并确定了其功能区域为N-末端。该研究结果对于深化我们对于TGEV的认识、理解其基本生物学过程以及寻找TGEV治疗方法等方面有着重要的理论价值和实际意义。