激活NF--κB信号通路牛病毒性腹泻病毒蛋白的筛选及功能域确定的开题报告.docx

激活NF--κB信号通路牛病毒性腹泻病毒蛋白的筛选及功能域确定的开题报告
一、选题背景
牛病毒性腹泻病毒（Bovineviraldiarrheavirus，BVDV）是一种广泛分布于全球性的rRNA病毒，能感染牛的各种器官。BVDV分为常规型和非常规型，其致病方式多种多样，且症状严重，导致牛群严重的经济损失。近年来，科学家们发现，BVDV通过激活NF-κB信号通路，来感染牛细胞进行复制和增殖，将NF-κB信号通路作为潜在治疗方案。
NF-κB家族是重要的转录因子家族，在生长发育、免疫调节、细胞增殖、细胞凋亡等多个生物学过程中发挥着重要作用。在体内静止的情况下，成千上万的NF-κB蛋白被“锁定”在细胞质内，受到IκB蛋白的正常负调控，而当细胞受到多种刺激（如感染、损伤等）而导致IκB蛋白的降解，NF-κB蛋白释放出来，转移至细胞核内，并与DNA结合调节基因表达水平。
BVDV感染宿主后，会有一系列与NF-κB反应相关的特征，包括IκBa的降解和p65的核转移，甚至包括BVDV诱导上述现象的机制。因此，研究BVDV在宿主细胞中激活NF-κB信号通路的机理和信号分子，可以为其他病毒感染开发先河，理解这些机理和分子也有助于构建更具鲁棒性和准确性的NF-κB信号通路的研究设备。
二、研究目的和研究内容
目的：确定BVDV蛋白激活NF-κB信号通路的位置并筛选感兴趣的BVDV蛋白
研究内容：
1.研究BVDV蛋白在NF-κB信号通路中发挥作用的机理和分子。
2.筛选BVDV蛋白，研究其与NF-κB信号通路的关系，以获得设计治疗或预防BVDV病毒感染的新方法。
3.确定感兴趣的BVDV蛋白的功能域。
三、研究意义
1.为治疗和预防BVDV病毒感染提供了新方法。
2.构建了更具鲁棒性和准确性的NF-κB信号通路的研究设备，对于其他病毒的感染也有参考价值。
3.研究对于深入理解NF-κB在疾病发生发展中的作用，有助于控制人类和动物某些疾病的发生。
四、研究方法
1.筛选不同样本组中的BVDV蛋白质，并采用实验室技术提取它们。
2.通过蛋白质相互作用分析等技术，从IκBa蛋白中确定能够与BVDV蛋白相互作用的部位。
3.制备不同domin的BVDV蛋白进行病毒感染实验，以确定感兴趣的BVDV蛋白集中活动的区域。
4.结果分析：将BVDV激活的NF-κB、IκB蛋白、p65核转移等信号通路和组分进行差异表达NE,Westernblot等技术分析、定量，从而后续工作开展。
五、研究预期结果
1.研究可确定BVDV在宿主细胞中激活NF-κB信号通路的机理和信号分子，展示BVDV蛋白在NF-κB信号通路激活中的位置。
2.筛选感兴趣的BVDV蛋白集中活动的部位，并对其功能域进行初步的确定。
3.确定BVDV蛋白在NF-κB信号通路中的作用，为治疗和预防BVDV病毒感染提供了新的方法，同时也有助于深入理解NF-κB在疾病发生发展中的作用，尤其是对于动物疾病治疗具有重要的参考意义。
六、进度计划
第一年：完成BVDV蛋白提取和筛选，并通过蛋白质相互作用分析等技术，确定与IκBa蛋白相互作用的区域。
第二年：通过制备不同domin的BVDV蛋白进行病毒感染实验，确定感兴趣的BVDV蛋白集中活动的区域，并进行功能域的初步确定。
第三年：通过NE、Westernblot等技术，定量BVDV激活的NF-κB、IκB蛋白、p65核转移等信号通路和组分的差异表达，进一步了解BVDV在宿主细胞中激活NF-κB信号通路的机理和信号分子。
七、结论
本研究以BVDV蛋白为研究对象，探究了BVDV在激活NF-κB信号通路中的机理和信号分子。可以确定感兴趣的BVDV蛋白集中活动的区域，并初步确定了其功能域。此外，将BVDV激活的NF-κB、IκB蛋白、p65核转移等信号通路和组分进行了定量分析，有助于深入理解NF-κB在疾病发生发展中的作用，为治疗和预防BVDV病毒感染提供了新的方法。