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第三章培养基灭菌与空气净化 第一节培养基灭菌 一、灭菌原理和方法 消毒是指用物理或化学方法杀死物料、容器、器具内外病原微生物。普通只能杀死营养细胞而不能杀死细菌芽孢。比如,巴氏消毒法,是将物料加热至60℃维持30min,以杀死不耐高温微生物营养细胞。 灭菌是用物理或化学方法杀死或除去环境中全部微生物,包含营养细胞、细菌芽孢和孢子。 消毒不一定能到达灭菌要求,而灭菌则可到达消毒目标。关于灭菌和消毒不正确了解是() A.灭菌是指杀灭环境中一切微生物细 胞、芽孢和孢子 B.消毒和灭菌实质上是相同 C.接种环用灼烧法灭菌 D.惯用灭菌方法有加热法、过滤法、紫外 线法、化学药品法防腐(antisepsis)除菌方法1.化学试剂灭菌法谷氨酸棒状杆菌培养液常采取灭菌方法是() A.高压蒸汽灭菌 B.高温灭菌 C.加入抗生素灭菌 D.酒精灭菌二、培养基湿热灭菌将配制好培养基同时放在发酵罐或其它装置中,通入蒸汽将培养基和所用设备一起进行加热灭菌过程,也称实罐灭菌。发酵罐连续灭菌流程与设备(3)维持罐,使料液在灭菌温度下保持57min。因为:连消塔加热时间很短,光靠这段时间灭菌是不够; (4)冷却管,使料液冷却到4050°C后(冷水喷淋),输送到预先灭菌过罐内。连续灭菌过程中温度改变(虚线)罐头食品在很长时间内不会腐败变质,是因为()。 A.罐头密封很严,细菌无法侵入 B.罐头密封很严,细菌无法呼吸 C.罐头在封罐前经过高温高压灭菌,封罐后 罐内没有细菌 D.罐头在封罐前经过高温高压灭菌,封罐后 罐内细菌无法生存第二节空气净化(除菌) 发酵对空气无菌程度要求 普通要求1000次使用周期中只允许有一个菌经过,即经过滤后空气无菌程度为N=10-3。空气中微生物(包含细菌、酵母、霉菌和病毒)含量普通为103~104个/米3。普通附着在空气中灰尘上或雾滴上。 灰尘粒子平均大小约0.6μm左右,空气除菌主要去除空气中微粒(0.6~1μm)。一、空气除菌方法二、空气过滤除菌原理与介质 1.过滤除菌种类 绝对过滤:过滤介质滤孔小于细胞和孢子。 如聚乙烯醇缩甲醛树脂(PVF)制成0.3m微孔滤膜。 深层介质过滤:介质孔隙普通大于微生物细胞。 如用棉花、玻璃纤维和颗粒活性炭填充过滤器。2.深层介质过滤原理 微粒随气流经过滤层时,因为滤层纤维层层妨碍,使气流出现无数次改变运动速度和方向绕流运动,引发微粒与滤层纤维间产生惯性冲击、拦截、布朗扩散、重力沉降、静电引力等作用把微粒滞留在纤维表面上,实现过滤目标。3.空气过滤除菌介质(2)纸类过滤介质——超细玻璃纤维纸 36张叠在一起使用,过滤效率高,压降小。 缺点:强度不大(尤其是受潮后)。发酵生产中制备无菌空气大致过程三、空气预处理 目标: 提升压缩前空气洁净度 去除压缩后空气中油和水1.提升压缩前空气洁净度 (1)提升空气吸气口位置 (2)在空气入口处设置粗过滤器 ——捕集较大灰尘颗粒,并保护空压机。高空取气管高效前置过滤除菌流程2.空气压缩和压缩空气冷却 (1)空气压缩:克服输送过程中过滤介质阻力并维持一定气流速度。 (2)压缩后空气温度显著上升,需冷却。因为 压缩后高温空气能引发过滤介质炭化或燃烧 增大发酵罐降温负荷 增加培养液水分蒸发 普通用列管式冷却器进行冷却。空气贮罐 消除压缩机排出空气量脉冲,维持稳定空气压力。 利用重力沉降作用除去部分油雾。 紧接空压机安装。 有些装有冷却管。3.压缩空气除油除水 冷却降温后空气湿度增大,会使过滤介质受潮失效。 两类设备 旋风分离器——利用离心力进行沉降,对于10m以上微粒分离效率较高。 丝网分离器——利用惯性进行拦截,分离效率较高,能除去2~5m细小颗粒。旋风分离器采取惯性拦截等机理,有效去除空气中水、油雾、尘埃,不锈钢丝网可清洗,使用寿命长。4.空气加热 将除油水空气加热(温差在10~15°C左右),降低相对湿度(达50%~60%)后,输入过滤器。 用列管换热器。空气过滤除菌设备流程四、空气过滤器 过滤除菌关键设备180M3发酵罐车间发酵车间空气过滤器空气净化流程