高脂喂养大鼠内脏脂肪组织GRP78mRNA的表达及意义的任务书.docx

高脂喂养大鼠内脏脂肪组织GRP78mRNA的表达及意义的任务书
任务书
一、任务背景
随着现代生活方式的改变，人们的饮食结构也发生了很大的变化，高脂饮食的人数日渐增多，这也导致了肥胖等代谢性疾病的大量发生。内脏脂肪组织是人体脂肪代谢的主要场所，与许多疾病的发生密切相关。而对于内脏脂肪组织的研究，包括其基因表达谱的变化，在肥胖等代谢性疾病的研究中具有很重要的作用。
一直以来，糖类调节蛋白78（GRP78）在研究代谢性疾病中扮演着重要的角色。作为内质网（ER）的分子伴侣，其在调节细胞内钙离子平衡和蛋白质折叠及修饰过程中起到关键性的作用。而在代谢紊乱的状态下，GRP78也会发生相应的改变，包括表达水平和翻译后修饰，因此，研究GRP78在内脏脂肪组织中的表达变化及可能的意义也具有一定的意义。
二、任务目的
本文旨在通过高脂喂养的大鼠模型，探究其内脏脂肪组织中GRP78mRNA的表达变化及可能的意义，为代谢性疾病研究提供参考。
三、任务内容
1.建立高脂喂养的大鼠模型
选用8只健康雄性SD大鼠，体重相近，随机分组，其中4只为高脂组，即采用高脂饲料喂养（高脂饲料成分：脂肪60%，碳水化合物20%和蛋白质20%），另外4只为对照组，采用普通饲料。喂养期为4周。
2.收集内脏脂肪组织样本
喂养结束后，所有大鼠均进行禁食12小时，并于次日清晨再次称重后处死，收集内脏脂肪组织样本（取内脏脂肪组织中部位，重量大约为1g），保存于液氮中。
3.RNA提取和实时荧光定量PCR
根据RNA提取试剂盒的说明，从上述样本中提取RNA，并进行实时荧光定量PCR（qPCR），检测GRP78mRNA的表达水平，并计算其相对表达量（ΔCt值）。同时，选取内脏脂肪组织中常见基因（如GAPDH）作为内参照基因，进行表达水平的归一化。
4.数据处理及统计学分析
使用SPSS软件对实验数据进行分析和统计。对于GRP78mRNA的表达量数据，采用t检验进行两组间的比较，并使用Pearson相关分析法进行常见基因和GRP78mRNA表达量的相关性分析。
五、参考文献
1.Zhang,Y.,Wolford,C.C.,Si,Y.,&Gong,F.(2015).TheroleofGRP78ininflammation-mediated…
2.Oslowski,C.M.,&Urano,F.(2011).Thebinaryswitchbetweenlifeanddeathofendoplasmicreticulum…
3.Ozcan,U.,Cao,Q.,Yilmaz,E.,Lee,A.H.,Iwakoshi,N.N.,Ozdelen,E.,...&Hotamisligil,G.S.(2004).Endoplasmicreticulumstresslinksobesity,insulinaction,andtype2diabetes.Science,306(5695),457-461.